[发明专利]松果菊‘王冠’的组织培养方法

权利要求书

1.一种松果菊‘王冠’的组织培养方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）无菌材料的获得

选取饱满的种子为材料，在超净工作台上用75%的酒精消毒10~40s，然后用无菌水冲洗3~5遍，再用次氯酸钠溶液消毒10~30分钟，然后用无菌水冲洗4~6遍，用无菌滤纸吸干多余水分后接种到MS培养基中，28~30天后待种子长出无菌苗；

（2）不定芽的诱导

将步骤（1）中获得的无菌苗作为材料，切下2-4cm的叶柄作为外植体，接种到诱导培养基上，调节pH至5.6~5.8，培养28~30天时间，培养温度为23~26℃，光照强度为1500~2000Lux，光照时间为10~12h；

（3）生根培养

将步骤（2）中诱导的高度2~5cm的丛生苗切成单株接种到生根培养基上，调节pH至5.6~5.8，培养18~20天后，基部长出3~24条主根，主根长度均值达到4.5cm；

（4）炼苗与移栽

将高度在2~5cm，叶片数在2~6片、根系长度在3~6cm的组培苗进行炼苗，打开瓶盖2~3天，使其适应外界环境，2~3天后洗掉根部的培养基，用700~900倍的多菌灵浸泡1~10分钟，移栽至大棚内，覆膜保湿且遮光。

2.如权利要求1所述的松果菊‘王冠’的组织培养方法，其特征在于：所述步骤（2）中的诱导培养基为MS+0.1~1.0 mg/L 6-苄氨基腺嘌呤+0.1~1.0mg/L 萘乙酸+30~32 g/L蔗糖+6.8~7.0g/L琼脂粉。

3.如权利要求1所述的松果菊‘王冠’的组织培养方法，其特征在于：所述步骤（3）中的生根培养基为1/2MS+0.1~1.0 mg/L 吲哚丁酸+30~32 g/L蔗糖+6.8~7.0g/L琼脂粉。