[发明专利]具有改进性能的抗‑C5aR抗体

说明书

本申请是申请日为2007年8月22日的题为“具有改进性能的抗-C5aR抗体”的中国专利申请号200780031002.5的分案申请。

技术领域

本发明涉及改进的抗体，其结合于C5aR并且在诊断和治疗方法中很有用。

背景技术

补体蛋白C3-C5中的每一个的蛋白分解产生具有称为过敏毒素（6-9）的信号分子的氨基末端阳离子片段。这些氨基末端阳离子片段中最有效的C5a引起最宽的响应。考虑到作为白细胞的着边（即炎症初期白细胞附集于血管壁，margination）和渗透的炎性响应的成分，颗粒结合的蛋白水解酶的释放、活化氧和氮衍生的自由基的产生改变了血流和毛细血管渗漏以及收缩平滑肌的能力，C5a分子是“完全”促炎介质。在亚纳摩尔至纳摩尔水平，C5a分子引发所有髓系（嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞、巨噬细胞和单核细胞）的趋化性，并引起血管通透性（通过前列腺素和循环粒细胞使其可能性显著加强）。更高的纳摩尔浓度引发NADPH氧化酶的脱粒和活化。这种宽度的生物活性与其他炎性介质形成对比。C5a牵涉到类风湿性关节炎、银屑病、败血症、再灌注损伤和成人呼吸窘迫综合征的发病机制（Gerard和Gerard,1994;Murdoch和Finn,2000）。

C5a的活性由C5a与其受体（C5aR）的结合介导。C5aR属于七次跨膜G-蛋白偶联受体的家族。C5aR是C5a的高亲和力受体，具有～1nM的Kd，并且位于大量不同的细胞型，包括白细胞上。每个细胞的受体的数量极高，高达每个白细胞200,000个位点。受体的生物学活化发生在整个使结合饱和的范围内。

C5aR结构与该七次跨膜受体家族一致，其中胞外N-末端后是通过作为胞内和胞外环交替的螺旋间结构域连接的七次跨膜螺旋，并以胞内C-末端结构域终止。C5aR包含扩展的N-末端胞外结构域。这种大的N-末端 结构域是典型的G-蛋白偶联受体，其结合包括IL-8和fMet-Leu-Phe（FMLP）受体家族的肽。

利用C5aR拮抗剂对C5a响应的抑制应减少经由C5a介导的急性炎性应答，而不影响其他补体成分。为此，在之前已经描述过C5aR肽拮抗剂和抗-C5a受体抗体（Watanabe et al.,1995;Pellas et al.,1998;Konteatis et al.,1994;Kaneko et al.,1995;Morgan et al.,1993）。例如，WO95/00164（Scripps Research Inst.）描述了针对C5a受体的N-末端肽（残基9-29）的抗体。

WO03/062278（G2疗法）描述了针对C5aR的胞外环而不是N-末端结构域的抗体，这在抑制C5a与C5aR结合中是有效的。在该申请中披露的具体单克隆抗体是MAb7F3、MAb12D4和MAb6C12。在这些单克隆抗体中，MAb7F3对C5aR具有最高的结合亲和力。

发明内容

现在，本发明的发明人开发了新型单克隆抗体，当相比于MAb7F3时，其对C5aR具有实质性改进的结合亲和力并且在小鼠关节炎模型中逆转炎症是高度有效的。

因此，本发明提供了一种抗体，包含与SEQ ID NO:3[3C5Vh]中示出的可变重链CDR1、CDR2或CDR3环序列共有至少80%同一性的至少一个CDR环序列，其中该抗体减少或抑制C5a与C5aR的结合。

在一种优选的实施方式中，该抗体包含与SEQ ID NO:3[3C5Vh]中示出的可变重链CDR1、CDR2或CDR3环序列共有至少80%同一性的至少两个CDR环序列。

在一种进一步优选的实施方式中，该抗体进一步包含与SEQ ID NO:4[3C5Vl]中示出的可变轻链CDR1、CDR2或CDR3环序列共有至少80%同一性的至少一个CDR环序列。

在一种进一步优选的实施方式中，该抗体包含与SEQ ID NO:4[3C5Vl]中示出的可变轻链CDR1、CDR2或CDR3环序列共有至少80%同一性的至少两个CDR环序列。

在一种进一步优选的实施方式中，该抗体包含分别与SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4中示出的重链和/或轻链序列共有至少80%同一性的序列，其中该抗体减少或抑制C5a与C5aR的结合。

在一种优选的实施方式中，该抗体结合于人类C5aR或其片段，其中

（i）当在相同条件下确定时，其IC₅₀值比MAb7F3低至少1.5倍；或