[发明专利]肿瘤坏死因子-α转化酶的多肽抑制剂的筛选方法及其应用

权利要求书

1.肿瘤坏死因子-α转化酶（TACE）的多肽抑制剂的筛选方法，所述方法包括如下步骤：

（1）检测候选多肽与TACE的结合能力，选择能结合的多肽；

（2）检测选择出的多肽能否被TACE剪切，选择能被剪切的多肽；

（3）检测选择出的多肽抑制TACE细胞活性的能力，选择有抑制效果的多肽。

2.权利要求1所述方法，其中所述候选多肽的确认包括以下步骤：

a 通过蛋白质设计软件生成代表多肽的线性三维结构；

b 获得TACE的催化结构域的晶体结构；

c 将上述代表多肽对接到该催化结构域的活性部位，并分析多肽的序列谱。

3.权利要求2所述方法，其中分析后选择多肽序列谱中具有较高亲和力的多肽作为候选多肽。

4.权利要求1-3任一所述方法，其中步骤（1）~（3）中，所述选择是相对于阴性对照进行的。

5.权利要求1-3任一所述方法，其中步骤（1）中，将TACE生物素化后，加入BSA偶联的多肽，用BLItz蛋白相互作用仪进行所述检测。

6.权利要求1-3任一所述方法，其中步骤（2）中，将所述多肽与TACE孵育后，用HPLC进行所述检测。

7.权利要求1-3任一所述方法，其中步骤（3）中，检测使用流式细胞仪法和/或MTT法。

8.一种设计以肿瘤坏死因子-α转化酶为靶标的多肽药物的方法，包括将权利要求1-7任一所述方法筛选获得的候选多肽用于设计所述多肽药物。

9.根据权利要求1-7任一所述方法获得的多肽。

10.权利要求9所述多肽在设计以肿瘤坏死因子-α转化酶为靶标的多肽药物中的应用。