[发明专利]核酸探针及其制备方法和用途

权利要求书

1.一种核酸探针，其特征在于，包括：

第一核酸分子，所述第一核酸分子能够与靶标特异性相互作用，并且所述第一核酸分子在与靶标特异性相互作用后展现出催化活性；以及

底物分子，所述底物分子与所述第一核酸分子相连，并且所述底物分子仅在所述第一核酸分子的催化活性作用下，能够产生可检测信号，

任选地，所述第一核酸分子包括：

识别序列，所述识别序列能够识别靶标；

第二核酸分子和第三核酸分子，所述第二核酸分子和第三核酸分子分别与所述识别序列的5’末端和3’末端相连，

任选地，所述识别序列的长度为10-100nt，优选为20-80nt，进一步优选为25-65nt，进一步优选为30-50nt，最优选为35-45nt，

任选地，所述识别序列为选自下列的至少之一：

（a）SEQ ID NO：1～38的至少之一所示的核酸序列；

（b）SEQ ID NO：1～38的至少之一所示的核酸序列的一部分；

（c）与（a）或（b）中所示核酸序列具有至少80%，优选至少90%，更优选至少95%，进一步优选至少99%序列同一性的核酸序列，

任选地，所述识别序列包含TTAGCG的核酸单元，

优选地，所述识别序列为SEQ ID NO：9所示的核酸序列，

任选地，所述第二核酸分子具有SEQ ID NO：39所示的核酸序列，第三核酸分子具有SEQ ID NO：40所示的核酸序列。

2.根据权利要求1所述的核酸探针，其特征在于，所述底物分子包括：

第四核酸分子，所述第四核酸分子可在所述第一核酸分子的催化活性作用下被切割；

第五核酸分子，所述第五核酸分子与所述第四核酸分子的5’端相连；以及

第六核酸分子，所述第六核酸分子与所述第四核酸分子的3’端相连，

其中，

所述第五核酸分子和第六核酸分子之一被信号发生分子修饰，并且

所述第五核酸分子和第六核酸分子的另一个被信号调节分子修饰，

任选地，所述信号发生分子与所述信号调节分子之间的间隔为1～10nt，

任选地，所述信号发生分子为荧光素，所述信号调节分子为荧光淬灭分子，所述可检测信号为荧光信号，

任选地，所述催化活性为RNA剪切功能，所述第四核酸分子由至少一个脱氧核糖核苷酸和/或核糖核苷酸构成。

3.一种核酸探针文库，其由多个权利要求1或2所述的核酸探针构成，

任选地，所述核酸探针文库为完全文库。

4.一种筛选核酸探针的方法，所述核酸探针能够识别预定靶标，其特征在于，所述方法包括：

将含有所述预定靶标的第一样品与候选核酸探针接触；以及

筛选产生可检测信号的核酸探针作为能够识别预定靶标的核酸探针，

其中，所述候选核酸探针为权利要求3所述的核酸探针文库的至少一部分，

任选地，进一步包括：

将不含所述预定靶标的第二样品与所述候选核酸探针接触；以及

去除其中产生可检测信号的核酸探针，

任选地，所述方法包括：

（1）重复进行至少一轮下列步骤：

将含有所述预定靶标的第一样品与候选核酸探针接触；以及

筛选产生可检测信号的核酸探针；

（2）将步骤（1）中所得到的核酸探针，重复进行至少一轮下列步骤：

将不含所述预定靶标的第二样品与步骤（1）中所得到的核酸探针接触；以及

去除其中产生可检测信号的核酸探针；

（3）将步骤（2）中所得到的核酸探针，重复进行至少一轮下列步骤：

将含有所述预定靶标的第三样品与步骤（2）中所得到的核酸探针接触；以及

筛选产生可检测信号的核酸探针，以便获得能够识别预定靶标的核酸探针。