[发明专利]重组猪细小病毒VP2蛋白、表达该蛋白的重组多角体病毒及其在疫苗制备和病毒诊断中的应用

权利要求书

1.一种重组猪细小病毒VP2蛋白，其特征在于所述重组猪细小病毒VP2蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.编码权利要求1所述的重组猪细小病毒VP2蛋白的核苷酸序列，优选的，所述的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

3.一种表达载体，其特征在于含有权利要求2所述的核苷酸序列。

4.一种宿主细胞。其特征在于含有权利要求3所述的表达载体。

5.权利要求1所述的重组猪细小病毒VP2蛋白在制备猪细小病毒VP2亚单位疫苗以及在制备诊断或检测猪细小病毒感染的试剂中的应用。

6.一种猪细小病毒VP2亚单位灭活疫苗，其特征在于含有权利要求1所述的重组猪细小病毒VP2蛋白。

7.一种用于诊断或检测猪细小病毒感染的ELISA诊断试剂盒，其特征在于含有权利要求1所述的重组猪细小病毒VP2蛋白。

8.一种表达猪细小病毒VP2蛋白的重组多角体病毒AcMNPV，命名为pFastBac-VP2，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其菌种保藏编号为：CGMCC No.9004，由该病毒株表达的猪细小病毒VP2蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

9.权利要求8所述的重组多角体病毒AcMNPV在制备猪细小病毒VP2亚单位灭活疫苗中的应用。

10.一种表达猪细小病毒VP2蛋白的方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）悬浮培养Sf9细胞，待细胞密度达到5-10×10⁵个细胞/毫升时，停止培养，准备接毒；

（2）保持摇床转速在120rpm的条件下，将权利要求8所述的重组多角体病毒AcMNPV以感染复数MOI为10PFU/细胞接入经步骤（1）培养得到的Sf9细胞，120rpm培养24-48小时后收获病毒；

（3）纯化VP2蛋白，即得。