[发明专利]一种吸入过敏原的化学发光定量检测试剂盒及其制备方法和检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及免疫分析领域，具体涉及一种吸入过敏原的化学发光定量检测试剂盒及其制备方法和检测方法。 

背景技术

化学发光技术在欧美发达国家比较成熟，以瑞士罗氏、美国雅培、美国贝克曼，德国西门子等进口品牌为代表，其质量可靠，性能稳定，主要集中在国内的三级以及部分二级医院开展，但由于各家试剂的产品特点及在国内的注册情况不同，一般三级医院会同时应用上述厂家不同系列的产品。 

过敏性疾病又称变态反应性疾病，是指机体通过吸入、食入、注入或接触某种含有致敏成分的物质（称为过敏原或变应原）后触发机体产生过量的免疫球蛋白E（IgE），从而引起各种功能性障碍或组织损伤的一类疾病，常表现为支气管哮喘、过敏性鼻炎、过敏性皮肤病等，有时会发生威胁生命的过敏性休克。过敏性疾病影响着全世界近1/4的人口，被世界卫生组织列为21世纪重点防治的三大疾病之一。实际上，很多的过敏性疾病，只要知道了过敏原，就可以采取简单的避免接触和谨慎使用的方式，防止过敏性疾病的发生，极大节省医疗开支，减少抗过敏类药物的使用。目前本项目的研究内容即是研发和优化与血清学抗原抗体反应原理相关的各种关键技术，从而提高针对临床患者体内IgE抗体的检测敏感度和特异性，并在此基础上开发出灵敏、稳定的纳米磁微粒免疫诊断试剂，从而快速、准确地确定机体相关的过敏原类型。 

相对于体外诊断试剂，过敏原检测的主要的替代品是皮试。这是传统的检测方法，具有准确性高、简便易行的优点。但是，皮试具有受检者痛苦、危险性高、发作期不能检查、依赖主管判断的致命缺点，江苏省和北京市都有过患者因皮试死亡的病例。而且，目前全国没有经过药监局批准的合法皮试产品，所以其替代性较差。 

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种灵敏度高的吸入过敏原的化学发光定量检测试剂盒。 

本发明所要解决的另一技术问题是提供上述试剂盒的制备方法。 

本发明所要解决的再一技术问题是提供采用上述试剂盒进行检测的检 测方法。 

为解决以上技术问题，本发明采取如下技术方案： 

一种吸入过敏原的化学发光定量检测试剂盒，包括如下试剂： 

磁分离试剂：标记有吸入过敏原的磁微粒悬浮液，所述的标记有吸入过敏原的磁微粒的浓度为0.1～1.0mg/ml； 

酶标试剂：含碱性磷酸酶标记的抗人IgE抗体溶液，所述的含碱性磷酸酶标记的抗人IgE抗体的浓度为0.5～1μg/ml。 

优选地，所述的吸入过敏原的纯度大于90%。 

优选地，所述的磁微粒具有超顺磁性，其直径为0.1～2μm，每克磁微粒表面的羧基含量不低于1毫摩尔。 

优选地，所述的吸入过敏原与所述的磁微粒的摩尔比为0.02～0.16:1。 

优选地，所述的抗人IgE抗体与所述的碱性磷酸酶的摩尔比为1:1～5。 

优选地，所述的碱性磷酸酶的纯度大于95%，比活性大于1000U/mg，浓度大于5mg/ml。 

优选地，所述的抗人IgE抗体的纯度大于95%，浓度大于1mg/ml。 

上述吸入过敏原的化学发光定量检测试剂盒的制备方法， 

磁分离试剂的制备方法为：将所述的磁微粒用0.04～0.06mol/L、pH4.5～5的2-吗啉乙磺酸缓冲液重悬；然后加入所述的吸入过敏原，在15～40℃下混悬30～60分钟；然后再加入新鲜配置的8～12mg/ml的碳二亚胺水溶液，在15～40℃下混悬2～12h，其中所述的2-吗啉乙磺酸缓冲液与所述的碳二亚胺水溶液的体积比为10～20:1；磁分离，去上清，用含质量比为4.5～5.5%的牛血清白蛋白、pH为8～9.5、物质的量浓度为0.01～0.5mol/L的三羟甲基氨基甲烷缓冲液重悬到所述的标记有吸入过敏原的磁微粒的浓度为0.1～1.0mg/ml，即得所述的磁分离试剂；