[发明专利]一种检测肉牛A-FABP基因单核苷酸多态性的方法有效
申请号: | 201410142764.4 | 申请日: | 2014-04-11 |
公开(公告)号: | CN103911450A | 公开(公告)日: | 2014-07-09 |
发明(设计)人: | 甘乾福;乔慧;梁学武;陈佳钦 | 申请(专利权)人: | 福建农林大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人: | 蔡学俊 |
地址: | 350002 福*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 肉牛 fabp 基因 核苷酸 多态性 方法 | ||
1.一种用于检测肉牛A-FABP基因单核苷酸多态性的引物,其特征在于:所述的引物对P1为:正向引物F:5'-AGGCGTGGGCTTTGCTAC-3';反向引物R:5'-GAATGGCTTTCCTCCTTCTACA-3'。
2.一种检测肉牛A-FABP基因单核苷酸多态性的方法,其特征在于:包括以下步骤:
⑴ 以包含A-FABP基因的待测牛基因组DNA为模版,以引物对P1为引物,PCR扩增牛A-FABP基因;
⑵ 对步骤⑴的扩增产物进行PCR目的片段检测;
⑶ 对步骤⑵的目的片段进行PCR-SSCP检测:首先对目的片段分别用变性剂进行变性处理,然后根据聚丙烯酰胺凝胶电泳结果判定其多态性位点。
3.根据权利要求2所述的一种检测肉牛A-FABP基因单核苷酸多态性的方法,其特征在于:所述多态性位点包括:在牛的A-FABP基因第2989位为A或G的碱基多态性位点,表现为AA、AG、GG三种基因型。
4.根据权利要求2所述的检测牛A-FABP基因单核苷酸多态性位点的方法,其特征在于,所述的PCR扩增反应程序为:94℃预变性5min;94℃变性30s;60℃退火40s;72℃延伸30s;72℃延伸7min;4℃保存。
5.根据权利要求2所述的检测牛A-FABP基因单核苷酸多态性位点的方法,其特征在于,所述的聚丙烯酰胺凝胶电泳采用10%的聚丙烯酰胺凝胶。
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