[发明专利]一种小叶矮生型广玉兰的嫩茎段离体培养方法

说明书

技术领域

本发明属于植物组织培养技术领域，具体涉及一种小叶矮生型广玉兰的嫩茎段离体培养方法。

背景技术

小叶矮生型广玉兰是近年从国外引进的广玉兰新树种，是广玉兰的变种，叶小，树体紧凑矮生，树高只占广玉兰的一半左右属名贵品种，可作绿化、盆花，四季常绿，观赏性强花色洁白优雅，4～5月开花，适应性强，耐零下15度低温。其种苗主要靠扦插、嫁接等常规方法繁殖(目前国内尚未推广)，但周期长且生根率低，无法满足生产用种苗之需。

诱导率直接体现了植物的繁殖率和繁殖速度，专利号为201110372472.6的中国专利：一种提高红麻子叶不定芽诱导率的方法，以红麻种子无菌苗子叶为外植体材料进行不定芽诱导、增殖，不定芽诱导培养基为：MS+0.1-3mg/L TDZ+0.01-1mg/LNAA+0.1-3mg/L AgNO3，不定芽增殖培养基为：MS+2mg/L 6-BA+0.1mg/L IBA+100mg/L LH；以上不定芽诱导、增殖的培养条件均以光、暗培养时间分别为14h和10h循环进行、光照强度为20000LX、温度为26±1℃的条件进行培养，红麻子叶不定芽的诱导最高可达到了85％。

又如专利号为201310255798.X的中国专利：一种广玉兰高效栽培方法，是在苗木栽植时加大密植，当苗木生长到干径5厘米以上时，对局部苗木进行增施肥料，对未增施肥苗木进行短截措施，在增施肥苗木干径达到10～12厘米后，对增施肥苗木进行移植，余下苗木再增施肥料。是利用广玉兰主枝顶端生长优势和强阳性特点，首先在苗木栽植时适当加大密植，充分利用土地和空间；当苗木生长到干径5厘米时采用施肥和短截及密度调整的方法，来改善苗圃中部分苗木生长环境，促进这些苗木快速优先生长；通过局部苗木的施肥，人为拉开苗木间的生长势，使部分苗木接受的光照、空气、水分和营养更多，其生长更加优势突出，可明显提高广玉兰出圃规格，提前实现苗木商品化和高效益；通过对未施肥苗木进行短截措施，可抑制这些苗木在短期内(3年左右)较慢生长，保证未短截苗木优先较快生长(即施肥苗)；在优势苗木达到商品苗后，对苗木进行移植并供应市场，余下苗木再增施肥料，由于密度的调整，阳光、空气、水分和营养空间增大了，苗木的生长就更加快了，苗圃的整体效益就提高了。

再如专利号为201110243132.3的中国专利：一种广玉兰的栽培方法，于冬季整地施肥，将田地挖60厘米深进行整地，每亩施基肥包括：鸡粪800～1200公斤、复合肥80～120公斤，或每施入腐熟的饼肥300～500公斤、复合肥100～200公斤；将1～2年生广玉兰嫁接苗定植培养，株距为1.8m～2.5m，行距为1.0m～1.8m，2～3年后于3月下旬至4月初进行隔株移栽，株距为1.8m～2.5m，行距为2.0m～3.6m；移栽后的3年内，在春季、夏季进行修剪，保留树冠高度为树高的1/3，主干在1.6m～2.0m下无分叉，及时摘心、除萌，并重点培养主干，发明目的是提高抗旱性、抗倒伏性、耐水性和生长速度。

以上公开的技术，虽然可提高植物某些性能指标，但周期仍较长，难满足大规模生产需要，而且是针对红麻、广玉兰等植物，与小叶矮生型广玉兰生长特点和性质有区别，目前针对小叶矮生型广玉兰栽培方法的研究还是空白。

发明内容

本发明的目的是提供一种繁殖率高、繁殖速度快的小叶矮生型广玉兰种苗培养方法。

为达到上述目的，本发明的技术方案是：

一种小叶矮生型广玉兰的嫩茎段离体培养方法，包括以下步骤：

1)、拟接种材料的选择与预处理：选取当年萌发的半木质化新枝，剪去已展平的叶片，用洗衣粉冲洗三遍，置于自来水龙头下冲洗3h；

2)、外植体的消毒：在超净台上，先用75％(vol)乙醇溶液消毒1～2min，然后用0.2％(vol)的新洁尔敏溶液消毒15min，最后用10％(vol)次氯酸钠溶液消毒15～20min，用无菌水冲洗三遍后无菌滤纸吸干水份；

3)、无菌系的建立：在超净台上将嫩枝切成1.3～2.0cm的茎段，每个茎段带1～2个茎节，切除切口处因消毒而坏死的组织，将外植体培养于第一培养基进行新芽的诱导培养，培育成无菌系；所述用于建立无菌系的第一培养基的配方为：MS+0.5～1mg/L ZT+1.0～2.0mg/L BA+0.05～0.1mg/L NAA+蔗糖30g/L+琼脂粉5.5～6.5g/L，pH值为5.6～5.8；