[发明专利]一种检测猪传染性胃肠炎病毒与猪流行性腹泻病毒的二重PCR方法

权利要求书

1.一种检测猪传染性胃肠炎病毒与猪流行性腹泻病毒的二重PCR方法，其特征在于，具体步骤如下：

（1）从感染TGEV、PEDV的阳性肠管组织提取RNA，反转录成cDNA，进一步以cDNA为模版，将分别针对TGEV和PEDV设计的2对引物同时加入PCR反应体系，进行PCR扩增；

（2）PCR结束后，对PCR产物作琼脂糖凝胶电泳分析，得到385bp特异性基因片段表示感染猪传染性胃肠炎病毒，得到628bp特异性基因片段表示感染猪流行性病毒；其中：

所述2对引物的序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4所示。

2.根据权利要求1所述的二重PCR方法，其特征在于：步骤（1）中PCR反应体系如下：cDNA模板1μl，2对上、下游引物各0.5μl，PCR Mix12.5μl，超纯水补充至50μl。

3.根据权利要求1所述的二重PCR方法，其特征在于：步骤（1）中PCR扩增反应条件如下：95℃预变性5min，进入95℃60s，52℃1min和72℃1min的循环，循环35次，最后72℃延伸5min。