[发明专利]一种提高黄芩毛状根黄芩苷产量的方法

权利要求书

1.一种提高黄芩毛状根黄芩苷产量的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）黄芩毛状根预培养

将黄芩毛状根以5～10g/L的接种量接种于改良的MS液体培养基中，然后于25～28℃避光培养4～6天，所述改良的MS液体培养基为添加有0.4～0.6mmol/L苯丙氨酸以及60～70g/L蔗糖的MS液体培养基；

2）毛状根的处理

将150～200mg经过预培养的黄芩毛状根在无菌条件下剪切成1.5～2cm的毛状根片段，将毛状根片段放置于无菌的培养皿中，然后用无菌风将培养皿中的毛状根片段吹干，然后将培养皿放入离子注入机靶室中对毛状根片段进行低能离子束注入；

3）以经过低能离子束注入后的毛状根片段为黄芩毛状根种子，对黄芩毛状根种子进行扩大培养。

2.根据权利要求1所述一种提高黄芩毛状根黄芩苷产量的方法，其特征在于：所述低能离子束注入的条件为：注入离子为N⁺，注入剂量为2.5×10¹⁶～3.5×10¹⁶ions/cm²，注入能量为15～25KeV，脉冲时间为5～10s，间隔时间为5～10s。

3.根据权利要求1所述一种提高黄芩毛状根黄芩苷产量的方法，其特征在于：所述扩大培养具体包括以下步骤：

1）种子培养

种子培养包括一级种子培养和二级种子培养，一级种子培养是指将50～60mg经过低能离子束注入后的毛状根片段接种于100～200mL所述改良的MS液体培养基中，然后在100～200r/min、25～28℃条件下避光培养5～10天获得毛状根A，二级种子培养是指将150～200mg毛状根A接种于300～500mL所述改良的MS液体培养基中，然后在100～200r/min、25～28℃条件下避光培养10～15天获得毛状根B；

2）培养基二次补加培养

将毛状根B以5～10g/L的接种量接种于500～1000mL所述改良的MS液体培养基中，然后在100～200r/min、25～28℃下避光培养，培养到10～20天补加300～500mL所述改良的MS液体培养基，然后继续在100～200r/min、25～28℃下避光培养10～20天后收获毛状根。