[发明专利]由壳聚糖凝胶微球制备的固定化多功能淀粉酶及其制备方法有效
申请号: | 201410149288.9 | 申请日: | 2014-04-14 |
公开(公告)号: | CN103937774A | 公开(公告)日: | 2014-07-23 |
发明(设计)人: | 张应玖;夏莹 | 申请(专利权)人: | 吉林大学 |
主分类号: | C12N11/10 | 分类号: | C12N11/10;C12N11/04;C12P19/14;A23L1/29 |
代理公司: | 长春吉大专利代理有限责任公司 22201 | 代理人: | 张景林;王恩远 |
地址: | 130012 吉*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 聚糖 凝胶 制备 固定 多功能 淀粉酶 及其 方法 | ||
1.一种由壳聚糖凝胶微球制备的固定化多功能淀粉酶,其特征在于:是以壳聚糖凝胶微球为载体,多功能淀粉酶通过共价键固定在壳聚糖凝胶微球上,壳聚糖凝胶微球上多功能淀粉酶的载酶蛋白数量为0.6~0.7毫克/克。
2.一种由壳聚糖凝胶微球制备的固定化多功能淀粉酶的制备方法,其步骤如下:
(1)初级壳聚糖凝胶微球的制备
将壳聚糖加入到乙酸溶液中,配制成1.0~3.0%(w/v)的壳聚糖的乙酸溶液,然后将该溶液逐滴加到等体积的2.0摩尔浓度的氢氧化钠溶液中,形成白色的凝胶微球;再将此凝胶微球室温放置24~32小时后,用去离子水反复冲洗至中性,得到硬化的初级壳聚糖凝胶微球;
(2)交联壳聚糖凝胶微球的制备
将上述初级壳聚糖凝胶微球加入到戊二醛溶液中,两者的用量比为0.1克:(1~2.0)毫升,振荡反应后用去离子水反复冲洗至中性,得到黄色的交联壳聚糖凝胶微球;
(3)多功能淀粉酶的固定化
配制0.1毫克/毫升的多功能淀粉酶的磷酸缓冲液溶液,再向该溶液中顺次加入5.0%(w/v)的淀粉溶液和交联壳聚糖凝胶微球,三者间的用量比例为(0.8~1.2)毫升:1毫升:0.1克;振荡反应后用磷酸缓冲液洗涤已载有多功能淀粉酶的壳聚糖凝胶微球,从而得到由壳聚糖凝胶微球制备的固定化多功能淀粉酶。
3.如权利要求2所述的一种由壳聚糖凝胶微球制备的固定化多功能淀粉酶的制备方法,其特征在于:乙酸溶液的浓度为2.0%(v/v)。
4.如权利要求2所述的一种由壳聚糖凝胶微球制备的固定化多功能淀粉酶的制备方法,其特征在于:振荡反应是在15~35℃、160~200转/分钟条件下振荡1.5~5.0小时。
5.如权利要求2所述的一种由壳聚糖凝胶微球制备的固定化多功能淀粉酶的制备方法,其特征在于:戊二醛溶液的浓度为1.5~3.5%(v/v)。
6.权利要求1所述的由壳聚糖凝胶微球制备的固定化多功能淀粉酶在制备功能性寡糖中的应用。
7.权利要求1所述的由壳聚糖凝胶微球制备的固定化多功能淀粉酶在制备保健品中的应用。
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