[发明专利]一种纳米级虫草微胶囊的制备方法

权利要求书

1. 一种纳米级虫草微胶囊的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）海藻酸钠载药体制备：将海藻酸钠加入到去离子水中，配制3-8wt%的海藻酸钠溶液，微孔滤膜加压过滤后获得海藻酸钠载药体；

（2）混合：将所述海藻酸钠载药体加入虫草菌丝体提取物溶液中混匀后再加入油相溶液，用高速分散机剪切分散，然后加入氯化钙固化，最后加入壳聚糖溶液混合；

（3）微胶囊制备：滤除未分散的固化物，然后离心去上清液，冷冻干燥，得到所需的微胶囊。

2. 根据权利要求1所述的一种纳米级虫草微胶囊的制备方法，其特征在于：所述步骤（1）具体是将海藻酸钠加入到去离子水中，配制3-8wt%的海藻酸钠溶液，然后加入重量占海藻酸钠溶液0.3-0.6%的PEG400和PEG600保持0.3-0.6h，用过滤精度为0.15-0.25um的微孔滤膜加压过滤后获得海藻酸钠载药体。

3. 根据权利要求2所述的一种纳米级虫草微胶囊的制备方法，其特征在于：所述PEG400和PEG600的摩尔比为1:1。

4. 根据权利要求2所述的一种纳米级虫草微胶囊的制备方法，其特征在于：在加入PEG400和PEG600之前还添加有与所述PEG400和PEG600质量和相同的EDC·HCl。

5. 根据权利要求1-4任一项所述的一种纳米级虫草微胶囊的制备方法，其特征在于：所述步骤（2）具体是将所述海藻酸钠载药体加入虫草菌丝体提取物溶液中混匀后再加入吐温20，用高速分散机剪切分散，然后加入氯化钙固化，最后加入壳聚糖溶液进行混合；所述聚L-谷氨酸的分子量为5000-30000；

所述海藻酸钠载药体、吐温20、氯化钙、壳聚糖溶液与所述虫草菌丝体提取物溶液的质量比为20-50:15-20:10-18: 25-40:30-50;

所述壳聚糖溶液的质量浓度为20-40%，其中还包含有占壳聚糖4-6wt%的聚L-谷氨酸和低聚糖，所述低聚糖分子量为1000-1200道尔顿。

6. 根据权利要求5所述的一种纳米级虫草微胶囊的制备方法，其特征在于：所述虫草菌丝体提取物溶液中的有效成分包括游离甾醇、虫草素和虫草多糖，所述游离甾醇在所述虫草菌丝体提取物溶液中的质量浓度为6-9%，所述虫草素在所述虫草菌丝体提取物溶液中的质量浓度为3-5%，所述虫草多糖在所述虫草菌丝体提取物溶液中的质量浓度为12-16%。

7. 根据权利要求5所述的一种纳米级虫草微胶囊的制备方法，其特征在于：所述游离甾醇、虫草素和虫草多糖的提取方法是：

A.将粒度为20-40目的虫草菌丝体冻干粉称重；

B.将所述虫草菌丝体冻干粉进行二氧化碳超临界萃取，分离获得虫草菌丝体超临界提取物和虫草菌丝体渣；

C.将超临界提取后的虫草菌丝体渣用水煎煮提取，将煎煮提取的提取液依次经真空减压浓缩和喷雾干燥后获得虫草多糖提取物；虫草菌丝体渣用水煎煮提取的方法为：向虫草菌丝体渣粉中加3-5倍水煎煮4-5h，加热煎煮提取三次，每次的保温时间为1-1.3 小时，离心分离提取液，合并三次提取液; 所述水为pH 值为7.5-7.7 的水，且水中含有0.03-0.1mg/L 的锌、0.05-0.08mg/L 的铁、10-12mg/L 的游离二氧化碳、60-70mg/L 的钙和0.1-0.2mg/L 的碘化物；

D.将获得的虫草菌丝体超临界提取物和虫草多糖提取物均匀混合，获得所述虫草菌丝体有效成分的提取物；

步骤A中，所述虫草菌丝体冻干粉采用如下步骤的方法制得：虫草液体发酵成虫草菌丝体，发酵液固液分离，采用冷冻干燥的方法将虫草菌丝体干燥，冷冻干燥后的虫草菌丝体进行粉碎即得；

步骤B中，所述二氧化碳超临界萃取的方法为：将所述虫草菌丝体冻干粉加入到超临界萃取釜中，在压力为18-26MPa，温度为35-50℃，CO₂ 流量为60-160L/min 的条件下，采用虫草菌丝体冻干粉质量的0.5-3倍的乙醇水溶液为夹带剂，萃取2-3h，在分离釜中分离获得虫草菌丝体超临界提取物和虫草菌丝体渣；

所述虫草为冬虫夏草；所述虫草菌丝体超临界提取物为游离甾醇、虫草素、SOD、不饱和脂肪酸等有效成分提取物。