[发明专利]一株产高产苯丙氨酸的菌株及其生产苯丙氨酸的方法

权利要求书

1.一株产L-苯丙氨酸的菌株，其特征在于，其分类命名为大肠杆菌WR1001（Escherichia coliWR1001）， 已于2013年7月7日保存于中国典型培养物保藏中心保藏，保藏编号：CCTCC NO: M 2013319。

2.一种利用权利要求1所述的大肠杆菌WR1001生产L-苯丙氨酸的方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）斜面培养

将实施例1获取的大肠杆菌WR1001接种到LB斜面培养基中，在37℃下培养1 d；

（2）种子培养

按步骤（1）所得的菌株接种量体积比5%-10%接种于种子培养基中，37℃、200rpm培养12h；

（3）发酵培养

将步骤（2）培养后的种子液接入发酵培养基，培养条件如下：温度37℃、搅拌速度200-800 rpm、接种量是体积比5%-10%、通气量1-3 vvm、溶氧10%-20%。

3.根据权利要求2所述的大肠杆菌WR1001生产L-苯丙氨酸的方法，其特征在于，所述LB斜面培养基/种子培养基配方为蛋白胨10 g/L、酵母粉5 g/L、NaCl 5g/L，pH7.0，固体培养基加琼脂15 g/L。

4.根据权利要求2所述的大肠杆菌WR1001生产L-苯丙氨酸的方法，其特征在于，所述发酵培养基配方为葡萄糖25 g/L、(NH₄)₂SO₄ 5 g/L 、KH₂PO₄ 3 g/L、MgSO₄ 3 g/L、NaCl 1g/L、柠檬酸钠1.5 g/L, CaCl₂·2H₂O 0.015 g/L、FeSO₄·7H₂O 0.1125g/L、L-Tyr 0.3g/L、蛋白胨5 g/L或者玉米浆 5.75g/L、酵母粉5 g/L、维生素B₁ 0.075 g/L、TES 1.5mL/L；其中TES组成为: Al₂(SO₄) ₃ ·18H₂O 2 g/L、CoSO₄·7H₂O 0.75 g/L、CuSO₄·5H₂O 0.25 g/L、H₃BO₃ 0.5 g/L、MnSO₄·7H₂O 24 g/L、 Na₂MoO₄·2H₂O 3 g/L、NiSO₄·6H₂O 2.5 g/L、 ZnSO₄·7H₂O 15 g/L；当葡萄糖耗完后，补加700g/L 的葡萄糖；当发酵22 h后，以0.06 g/h的速度流加10 g/L的L-酪氨酸。