[发明专利]一株嗜碱假单胞菌AD-28及其在水体脱氮中的应用

权利要求书

1.一种嗜碱假单胞菌，其特征在于拉丁名：Pseudomonas alcaliphila，AD-28，分离自天津市西青区水产养殖池中，由中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏号CGMCC No.8991。

2.权利要求1所述嗜碱假单胞菌AD-28保藏号CGMCC No.8991在制备养殖水体、污染水体快速脱氮菌剂方面的应用。

3.权利要求2所述的应用，其中的快速脱氮指的是在单一含氮污染物条件下，24 h对初始浓度160 mg/L的氨氮去除率在95%，对初始浓度120 mg/L亚硝态氮和初始浓度100 mg/L的硝态氮去除率均达99%；在初始浓度为硝态氮183.72 mg/l，亚硝态氮 44.67 mg/l，氨氮40.20mg/l的混合含氮污染物条件下，接菌24h，AD-28对氨氮、亚硝态氮和硝态氮的去除率均达到96%。

4.权利要求2所述的应用，其快速脱氮还指在15℃的低温环境下的应用，其在15℃单一含氮污染物条件下，48 h对初始浓度17 mg/L的氨氮和13 mg/L亚硝态氮去除率分别为91.2%和99%，72h对初始浓度128 mg/L的硝态氮去除率均达99%。

5.权利要求1所述嗜碱假单胞菌AD-28保藏号CGMCC No.8991 的发酵培养方法，其特征在于按如下的步骤进行：

（1）微生物菌株：嗜碱假单胞菌Pseudomonas alcaliphila AD-28 CGMCC No.8991；

（2）活化培养：将低温保存的嗜碱假单胞菌AD-28斜面菌种接种到含有固体培养基的平板中，25-35 ℃条件下，静置培养24-48 h；

（3）种子培养：在步骤（2）中活化的嗜碱假单胞菌AD-28，在无菌条件下用接种环接种于装有100ml液体培养基的250ml三角瓶中，25-35 ℃条件下，150转/min的摇床中震荡培养24-48 h；

（4）发酵罐培养：将步骤（3）中培养的液体菌种以2%接种量接种于装有液体培养基的发酵罐中，25-35 ℃条件下，通气量0.6 m³/min，转速为100 r/min，培养24-48 h；

培养基成分为：柠檬酸钠2-5 g，(NH₄)₂SO₄ 1-2g，KH₂PO₄ 1 g，MgSO₄·7H₂O 0.2 g，蒸馏水1 000 ml，pH7-8。