[发明专利]一种羟基多溴联苯醚的液相色谱串联质谱检测方法

说明书

技术领域

本发明属于食品有机污染物的检测领域，是利用液相色谱串联质谱快速、准确地检测羟基多溴联苯醚的方法。 

背景技术

羟基多溴联苯醚(OH-PBDEs)是一类持久性有机污染物，来源主要包括两个方面，一是海洋藻类的自然释放，一是PBDEs的生物转化。OH-PBDEs除与PBDEs具有类似的毒性作用外，还具有影响雌二醇合成，干扰氧化磷酸化(OXPHOS)作用等毒理特征，如2-OH-BDE-47和2-OH-BDE-85能够抑制人类肾上腺皮质癌细胞系(H295R)的细胞增殖，扰乱细胞周期，干扰H295R基因的表达，引起内质网(ER)应激和未折叠蛋白反应(UPR)转录的改变。OH-PBDEs也被证明能在有机体的血液中积累。 

OH-PBDEs是新型高毒性有机污染物，目前国内外的研究工作及人们对它的认识尚处于起步阶段，检测OH-PBDEs也没有明确的标准方法。目前，文献报道中检测OH-PBDEs有采用气相色谱串联质谱法的，但用气相色谱串联质谱法需繁琐的衍生化处理过程，多数人则采用高效液相色谱串联质谱法。在液相色谱串联质谱法中，碰撞电压是MS/MS分析的关键，碰撞电压能量不足，难以出现二次电离，无子离子生成，能量过高，产生碎片离子成分复杂，且母离子消失。选择合适的碰撞电压是建立一个好的检测方法的基础；另外，合适的色谱分离条件是有效分离7种OH-PBDEs的又一个关键。 

发明内容

本发明目的在于提供一种操作简便、分析迅速的OH-PBDEs的液相色谱串联质谱(LC-ESI-MS/MS)检测方法。本发明的技术方案如下： 

(1)LC-MS/MS条件 

液相色谱选用C18反相色谱柱(150mm×2.00mm，3μm)；柱温：35℃；进样量：10μL；流动相：乙腈和0.1％甲酸，梯度洗脱：0～10min，乙腈由65％增至75％，10～12min，乙腈保持75％，12～17min，乙腈由75％降至65％；流速：0.25mL/min。 

质谱采用电喷雾，电喷雾负离子扫描模式(ESI^-)，多重反应监测(MRM)；离子喷雾电压：4500V；离子源温度T：500℃；雾化气Gas1：25；雾化气Gas2：20。 

(2)OH-PBDEs液相色谱串联质谱检测标准曲线的绘制 

准确量取100μL10μg/mLOH-PBDEs标准溶液于10mL棕色容量瓶中，用乙腈定容至10 mL，配制成100ng/mL的OH-PBDEs储备液。将100ng/mL的储备液逐级稀释成50ng/mL，25ng/mL，5ng/mL，2ng/mL，0.5ng/mL，0.25ng/mL，用建立好的LC-MS/MS方法分析系列标准溶液，以OH-PBDEs标准溶液浓度为横坐标(X)，峰面积为纵坐标(Y)，绘制标准曲线，用于分析样品中OH-PBDEs的含量。 

(3)最低检出限的确定 

通过不断降低标准溶液浓度，按“方案(1)LC-MS/MS条件”中检测条件进行检测，取信噪比为3时的浓度为最低检出限。 

本发明的优点与有益效果是：采用本发明的LC-MS/MS法检测OH-PBDEs，方便快捷，灵敏度高，有利于OH-PBDEs的快速检测，可用于大规模样品检测，适于标准化。 

附图说明

图1为7种OH-PBDEs的标准曲线，横坐标为OH-PBDEs浓度，纵坐标为色谱峰峰面积。 

图2为7种OH-PBDEs混标溶液的HPLC-ESI-MS/MS色谱图。 

具体实施方式

下面结合实施例对本发明做进一步详细说明，但本发明并不仅仅局限于下述实施例。 

实施例1 

准确量取100μL10μg/mL OH-PBDEs标准溶液于10mL棕色容量瓶中，用乙腈定容至10mL，配制成100ng/mL的OH-PBDEs储备液。取100ng/mL的储备液1mL，针泵进样，得到7种OH-PBDEs的最佳质谱参数(见表1)。 

表1 7种OH-PBDEs的保留时间、离子对和MRM参数 

注：a定量离子对，b定性离子对 

实施例2