[发明专利]硫柳汞在荧光定量PCR中的应用有效
| 申请号： | 201410161379.4 | 申请日： | 2014-04-21 |
| 公开（公告）号： | CN105018577B | 公开（公告）日： | 2019-01-18 |
| 发明（设计）人： | 时彦祎;王进;杨心意;覃雨棠 | 申请（专利权）人： | 珠海宝锐生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6851 | 分类号： | C12Q1/6851 |
| 代理公司： | 北京联瑞联丰知识产权代理事务所(普通合伙) 11411 | 代理人： | 黄冠华 |
| 地址： | 519000 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 硫柳汞 荧光 定量 pcr 中的 应用 | ||
1.一种荧光定量PCR反应液，其特征在于，所述反应液包含有作为协同增强剂的硫柳汞；所述硫柳汞的终端质量浓度为0.001％，所述反应液还包含有终端质量浓度为2.5％的聚乙二醇4000或终端摩尔浓度为200mM的海藻糖；
所述反应液还包含有耐热DNA聚合酶，所述DNA聚合酶具有5’-3’聚合酶活性和5’-3’外切酶活性。
2.根据权利要求1所述的荧光定量PCR反应液，其特征在于，所述反应液还包含有耐热DNA聚合酶，所述DNA聚合酶具有5’-3’聚合酶活性和3’-5’校正酶活性。
3.根据权利要求2所述的荧光定量PCR反应液，其特征在于，所述的耐热DNA聚合酶为热启动DNA聚合酶，包括化学修饰、抗体修饰或配基修饰的DNA聚合酶。
4.一种包含有硫柳汞的定量PCR反应液，其特征在于，所述反应液按质量分数计包含0.001％的硫柳汞、2.5％的聚乙二醇4000和2～10％的甘油，此外所述反应液还包含有0-100mM的KCl、10～100mM的Tris-HCl、0～50mM的(NH4)2SO4、0.2～0.4mM的dNTP、2～12mM的Mg2+和0.01～0.2U/μl的热启动DNA聚合酶。
5.一种包含有硫柳汞的定量PCR反应液，其特征在于，所述反应液按质量分数计包含0.001％的硫柳汞、2～10％的甘油，还包含有10～100mM的Tris-HCl、200mM的海藻糖、0-50mM的KCl、0～50mM的NH4Cl、0.2～0.4的mM dNTP、2～12mM的Mg2+和0.01～0.2U/μl的热启动DNA聚合酶。
6.根据权利要求5所述的反应液，其特征在于，所述反应液按质量分数计包含0.001％的硫柳汞，还包含200mM的海藻糖，0.02-0.12U/μl的热启动DNA聚合酶。
7.一种荧光定量PCR试剂盒，包含权利要求1-5任一项所述的反应液。
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