[发明专利]鉴定或辅助鉴定美国白蛾的组合物及其检测方法有效
| 申请号： | 201410162606.5 | 申请日： | 2014-04-22 |
| 公开（公告）号： | CN103911457A | 公开（公告）日： | 2014-07-09 |
| 发明（设计）人： | 钱路;安榆林;叶兼菱;吴晶;宋俊贤;徐梅;郑斯竹;吕飞;吴翠萍;李彬;汪潇琳 | 申请（专利权）人： | 江苏出入境检验检疫局动植物与食品检测中心 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 南京汇盛专利商标事务所(普通合伙) 32238 | 代理人： | 袁静 |
| 地址： | 210001*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 鉴定 辅助 美国 组合 及其 检测 方法 | ||
1.鉴定或辅助鉴定美国白蛾的组合物，由一个引物对和一个探针组成；所述引物对由SEQ ID NO:1所示DNA和SEQ ID NO:2所示DNA组成；所述探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。
2.根据权利要求1所述鉴定或辅助鉴定美国白蛾的组合物，其特征在于所述探针的5’末端标记有荧光报告基团FAM，3’末端标记有荧光淬灭基团NFQ。
3.权利要求1-2中任一项所述组合物在制备用于检测或辅助检测待测样品是否为美国白蛾的试剂盒中的应用。
4.用于检测美国白蛾的试剂盒，包含权利要求1-2之一所述组合物。
5.权利要求1-2中任一项所述组合物在检测或辅助检测待测样品是否为美国白蛾中的应用。
6.检测或辅助检测待测样品是否为美国白蛾的方法，包括如下步骤：以待测样品中提取的总DNA为模板，采用权利要求1-2任一项所述组合物，或权利要求4所述试剂盒进行实时荧光PCR检测，从而确定待测样品是否为美国白蛾。
7.根据权利要求6所述方法，其特征在于所述PCR体系中，所述引物对中的引物及探针的摩尔浓度之比为2:2:1。
8.根据权利要求6或7所述方法，其特征于所述PCR体系为：TaqMan mix混合反应液 10μl，上游引物为0.5μl，下游引物为0.5μl，探针为0.25μl，DNA模板1μl，5 U/μl的Taq DNA聚合酶0.1 μl，加ddH2O补足到20μl。
9.根据权利要求8所述方法，其特征于所述反应程序为： 50℃ 2 min，95°C预变性10min；进入循环，95°C 15s，60°C 60s，共40个循环。
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