[发明专利]一种纳米铝佐剂/自体肿瘤疫苗的制备方法无效
申请号: | 201410166708.4 | 申请日: | 2014-04-23 |
公开(公告)号: | CN103948921A | 公开(公告)日: | 2014-07-30 |
发明(设计)人: | 张东生;刘慧;杜益群;张皓 | 申请(专利权)人: | 东南大学 |
主分类号: | A61K39/39 | 分类号: | A61K39/39;A61K39/00;A61P35/00 |
代理公司: | 江苏永衡昭辉律师事务所 32250 | 代理人: | 王斌 |
地址: | 210096*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 纳米 佐剂 肿瘤 疫苗 制备 方法 | ||
1.一种纳米铝佐剂/自体肿瘤疫苗的制备方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:
1)制备纳米铝佐剂:
按质量比1:1:1将苯扎溴铵、正辛醇、环己烷高速混合后搅拌均匀,得到的混合溶液置入磁力搅拌器上,按正辛醇与AlCl3质量比1:1.3~1.5,将后者加入所述混合溶液中搅拌20min以上,然后按20~30滴/min的速度向混合溶液中滴加氨水,保持反应体系PH>10反应2h,得到乳浊液;
向所述乳浊液中加入丙酮,至乳浊液变清,以>500rpm的速度离心,弃去上清液,得到沉淀物;最后将沉淀物先后用双蒸水、乙醇离心洗涤各三次后,置于干燥箱中干燥,即得到纳米铝佐剂;
2)制备纳米铝佐剂/自体肿瘤疫苗:
将H22肝癌细胞悬液与浓度为2~4mg/ml的纳米铝佐剂4℃共孵育7天,即得到纳米铝佐剂/自体肿瘤疫苗。
2.根据权利要求1所述的纳米铝佐剂/自体肿瘤疫苗的制备方法,其特征在于,所述步骤2)中,H22肝癌细胞悬液是按照如下方法制备的:小鼠腹腔接种H22肝癌细胞,待腹水产生后,无菌条件下抽取腹水,离心取沉淀,加入磷酸盐缓冲液制备成浓度为1×108~3×108个/ml细胞悬液,将细胞悬液经65℃30min水浴处理后即可。
3.一种纳米铝佐剂/自体肿瘤疫苗,其特征在于,该疫苗是按照权利要求1或2所述方法制备得到。
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