[发明专利]光控四唑-烯点击化学合成多肽水凝胶的制备方法有效

申请号：	201410167756.5	申请日：	2014-04-24
公开（公告）号：	CN103992486A	公开（公告）日：	2014-08-20
发明（设计）人：	夏建飞;赵凯;王宗花;蔡峰;张菲菲;夏霖;迟德玲;李延辉;夏延致;夏临华	申请（专利权）人：	青岛大学
主分类号：	C08J3/075	分类号：	C08J3/075;C08J3/24;C08L89/00;C08H1/00;A61K47/42;A61K49/00;A61K9/06
代理公司：	济南圣达知识产权代理有限公司 37221	代理人：	杨琪
地址：	266003 山***	国省代码：	山东;37
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摘要：
搜索关键词：	光控点击化学合成多肽凝胶制备方法
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【权利要求书】：

1.光控四唑-烯点击化学合成多肽水凝胶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

多肽四唑衍生物的合成：

(1)在氮气的保护下，向50mL两颈瓶中加入0.2～0.4g四唑，二氯甲烷15～20ml搅拌至溶解，得到四唑的二氯甲烷溶液；

(2)向四唑的二氯甲烷溶液中加入DCC150～200mg继续搅拌15～20min，得到四唑溶液；

(3)将多肽溶于5～10mL二氯甲烷中，得多肽溶液，其中，多肽的氨基酸序列为ThrSerThrSerThrSerThrSerThrSerThrSer，将上述多肽溶液加入到步骤(2)所得的四唑溶液中，搅拌15～20min；向多肽与四唑的混合液中加入10～15mg DMAP，反应10～12h，过滤，滤液用冰乙醚沉淀，干燥后得到多肽分子的四唑衍生物；

多肽水凝胶的光控点击合成：

(4)分别将步骤(3)所得多肽四唑衍生物和端基修饰烯丙基的双链DNA溶于Tris-HCl缓冲液中，至完全溶解，其中多肽与DNA的摩尔比为1:2～1:4；

(5)将步骤(4)所得混合液在37℃下混合均匀后，于真空条件下，置于波长300～400nm的紫外灯下，光照100～200s，引发四唑-烯点击化学反应，迅速交联形成具有荧光性能的多肽水凝胶。

2.如权利要求1所述的光控四唑-烯点击化学合成多肽水凝胶的制备方法，其特征在于，步骤(3)所述多肽与四唑的摩尔比为1:6。

3.如权利要求1所述的光控四唑-烯点击化学合成多肽水凝胶的制备方法，其特征在于，所述双链DNA中的一条为核酸适体链。

4.如权利要求1所述的光控四唑-烯点击化学合成多肽水凝胶的制备方法，其特征在于，所述核酸适体链为AS1411适体或sgc8适体。

5.如权利要求1所述的光控四唑-烯点击化学合成多肽水凝胶的制备方法，其特征在于，步骤(4)所述多肽与DNA的摩尔比为1:3。

6.如权利要求1所述的光控四唑-烯点击化学合成多肽水凝胶的制备方法，其特征在于，步骤(4)所述Tris-HCl缓冲液的pH7.4，含10mM NaCl。

7.如权利要求1所述的光控四唑-烯点击化学合成多肽水凝胶的制备方法，其特征在于，步骤(5)所述紫外光波长为375nm。

8.如权利要求1所述的光控四唑-烯点击化学合成多肽水凝胶的制备方法，其特征在于，步骤(5)所述光照时间为180s。

9.权利要求1-8任一项所述的方法制备的一种光控四唑-烯点击化学合成多肽水凝胶。

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