[发明专利]结核分枝杆菌特异性重组蛋白OTC及其制备方法和应用无效
申请号: | 201410171898.9 | 申请日: | 2014-04-25 |
公开(公告)号: | CN103911356A | 公开(公告)日: | 2014-07-09 |
发明(设计)人: | 吴雪琼;阳幼荣;张俊仙;赵卫国;冯金栋;梁艳 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军第三〇九医院 |
主分类号: | C12N9/10 | 分类号: | C12N9/10;C12N15/54;C12N15/70;G01N33/53;C12R1/32 |
代理公司: | 北京市广友专利事务所有限责任公司 11237 | 代理人: | 耿小强 |
地址: | 100091 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 结核 分枝杆菌 特异性 重组 蛋白 otc 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种结核分枝杆菌特异性重组蛋白OTC,其特征在于:所述的结核分枝杆菌特异性重组蛋白OTC的核苷酸序列如序列表中序列1所示。
2.如权利要求1所述的结核分枝杆菌特异性重组蛋白OTC的制备方法,包括如下步骤:
(1)在OTC上游引物添加Nhe I酶切位点,在下游引物添加EcoR I酶切位点,将PCR扩增产物用Nhe I和EcoR I双酶切后,插入用Nhe I和EcoR I双酶切后的pET30aSETB质粒载体中;转化到大肠杆菌BL21(DE3)受体菌中;经过质粒提取,经T7和T7t双向测序验证,获得核苷酸序列与设计完全一致的重组质粒OTC/pET30aSETB;
(2)将OTC大肠杆菌基因工程株经过诱导、表达、纯化,SDS-PAGE电泳、鉴定及ELISA分析,获得与实际设计相符的纯化重组蛋白。
3.如权利要求2所述的结核分枝杆菌特异性重组蛋白OTC的制备方法,其特征在于:所述的上游引物为:
5'-CTAGCTAGCATGATCAGGCATTTCCTGCG-3'
所述的下游引物为:
5’-CCGGAATTCTTATGAGCGCTCCAGCAGCCA-3'。
4.如权利要求1所述的结核分枝杆菌特异性重组蛋白OTC在制备结核抗体检测试剂盒中的应用。
5.如权利要求4所述的结核分枝杆菌特异性重组蛋白OTC在制备结核抗体检测试剂盒中的应用,其特征在于:所述的试剂盒为血液或尿液结核抗体化学发光酶免疫检测试剂盒。
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