[发明专利]一种三阶段混菌固态发酵制备酒糟蛋白饲料的方法

权利要求书

1.一种三阶段混菌固态发酵制备酒糟蛋白饲料的方法，其特征是：

（1）第一阶段混菌固态发酵

以100重量份新鲜丢糟为底物，石灰调节pH值6.5，接入10% A组芽孢杆菌组合种子菌液，混匀装入麻袋，堆积发酵自然升温到60～65℃后，倒出麻袋平摊生产场地降温到45℃，再堆积发酵升温到60℃，采用翻堆、堆积、平摊方式维持发酵温度在55～60℃之间，经2～3d发酵后，得到酒糟醅料；

（2）第二阶段混菌固态发酵

在第一阶段发酵结束的100重量份酒糟醅料中分别加入15～18%重量份槐树叶粉、10～12%重量份杨树叶粉、10～12%重量份麸皮、0.15%重量份磷酸氢二钾、0.1%重量份硫酸镁和2%重量份硫酸铵，同时在接入6%重量份白地霉二级种子菌液、6%重量份热带假丝酵母二级种子菌液、6%重量份康宁木霉的二级种子菌液，加水调节为含水量60～65%，混匀、扬散后制成发酵醅料；

将发酵醅料直接在生产场地堆积发酵，发酵温度控制在32℃～34℃之间，堆积发酵时间6d，发酵过程采用翻堆、堆积、平摊方式维持发酵温度32℃～34℃之间；

（3）第三阶段混菌固态发酵

在第二阶段混菌固态发酵得到的100重量份发酵醅料中，分别接入12～18%B组芽孢杆菌组合种子菌液，在生产场地堆积发酵自然升温到60℃后，平摊降温至45～50℃，再堆积发酵，采用翻堆、堆积、平摊方式维持发酵温度50～60℃之间，堆积发酵时间2d，得到新鲜酒糟蛋白饲料；

经第三阶段混菌固态发酵得到新鲜酒糟蛋白饲料，以55～65℃通风烘干、粉碎后，输送到造粒机制备成颗粒酒糟蛋白饲料。

2. 根据权利要求1所述的一种三阶段混菌固态发酵制备酒糟蛋白饲料的方法，其特征是所述的A组芽孢杆菌组合种子菌液，其制备过程如下：

（1）从斜面试管中挑出地衣芽孢杆菌20166，接入芽孢杆菌种子培养基，调节pH值为6.8，培养温度34℃，摇瓶转速为200r／min，培养时间36h，得到地衣芽孢杆菌20166一级种子菌液；

（2）将地衣芽孢杆菌20166一级种子菌液接入芽孢杆菌种子培养基，接种量为芽孢杆菌种子培养基重量的10%，调节pH值为6.0，培养温度34℃，通气量0.05～0.1m3/（m3·min），培养时间96h，得到地衣芽孢杆菌20166二级种子菌液；

（3）从斜面试管中挑出短小芽孢杆菌10440，接入芽孢杆菌种子培养基，调节pH值为6.8，培养温度34℃，摇瓶转速为200r／min，培养时间36h，得到短小芽孢杆菌10440一级种子菌液；

（4）将短小芽孢杆菌10440一级种子菌液接入芽孢杆菌种子培养基，接种量为芽孢杆菌种子培养基重量的10%，调节pH值为6.0，培养温度34℃，通气量0.05～0.1m3/（m3·min），培养时间96h，得到短小芽孢杆菌10440二级种子菌液；

将地衣芽孢杆菌20166二级种子菌液与短小芽孢杆菌10440二级种子菌液按照重量份3：1的比例配成A组芽孢杆菌组合种子菌液。

3.根据权利要求1所述的一种三阶段混菌固态发酵制备酒糟蛋白饲料的方法，其特征是所述的B组芽孢杆菌组合种子菌液，其制备过程如下：

（1）斜面试管中挑出枯草芽孢杆菌枯草亚种20872，接入芽孢杆菌种子培养基，调节pH值为6.8，培养温度34℃，摇瓶转速为200r／min，培养时间36h，得到枯草芽孢杆菌枯草亚种20872一级种子菌液；

（2）将枯草芽孢杆菌枯草亚种20872一级种子菌液接入芽孢杆菌种子培养基，接种量为芽孢杆菌种子培养基重量的10%，调节pH值为6.0，培养温度34℃，通气量0.05～0.1m3/（m3·min），培养时间96h，得到枯草芽孢杆菌枯草亚种20872二级种子菌液；

（3）斜面试管中挑出枯草芽孢杆菌22974，接入芽孢杆菌种子培养基，调节pH值为6.8，培养温度34℃，摇瓶转速为200r／min，培养时间36h，得到枯草芽孢杆菌22974一级种子菌液；

（4）将枯枯草芽孢杆菌22974一级种子菌液接入芽孢杆菌种子培养基，接种量为芽孢杆菌种子培养基重量的10%，调节pH值为6.0，培养温度34℃，通气量0.05～0.1m3/（m3·min），培养时间96h，得到枯草芽孢杆菌22974二级种子菌液；

将枯草芽孢杆菌枯草亚种20872二级种子菌液与枯草芽孢杆菌22974二级种子菌液按照重量份1：4的比例配成B组芽孢杆菌组合种子菌液。