[发明专利]利用雪铁芋复叶轴高效生产原球茎的方法

说明书

技术领域

本发明属于花卉栽培技术领域，具体涉及一种利用雪铁芋复叶轴高效生产原球茎的方法。

背景技术

雪铁芋(Zamiolulcas zamiif olia)为天南星科美铁芋属多年生常绿草本植物，因其小叶呈偶数羽状排列在复叶轴，且叶质厚实，叶色光亮，宛若一挂串连起来的钱币，寓意招财进宝、吉祥富贵，故又名金钱树。

雪铁芋目前生产上采用的分根和叶插繁殖法繁殖系数低、周期长，已远远不能满足市场需求，并且本课题组进行叶插繁殖试验发现，叶插繁殖法只能做到一叶一苗，且叶插不定芽的发生至少需半年左右。叶插较低的繁殖系数和较长的繁殖时间已无法满足生产上对优良种苗的大量需求。并且上述繁殖方法无法进行品种改良和优良新品种培育。本发明把原球茎作为目标繁殖体，通过其快繁研究首先解决上述生产难题，其次以原球茎为载体运用现代生物技术进行品种改良和新品种培育研究。

检索“国家知识产权局专利检索系统”，关于金钱树繁殖的发明专利申请有3项：

《水根金钱树的培育方法》发明内容是水植金钱树；

《一种金钱树水培的方法》发明内容是剪取叶柄直接插入水中培养，使叶柄长根，得到金钱树小植株；

《一种金钱树土培方法》发明内容是将叶柄在已消毒的空容器中进行预培养待切割口愈合后，再插入培养土中培养，得到金钱树小植株。

本发明与上述三项发明有三点区别：

一是所用植物材料部位不同。本发明所用植物材料部位是“复叶轴”，与上述三项发明所用“叶柄”不同。

二是培养目的不同。本发明是用复叶轴直接诱导原球茎，上述三项发明是先使叶柄生根，然后得到小苗。

第三点区别是培养基不同。上述三项发明培养基是用普通水和土，本发明使用自制培养液。

通过检索“清华同方CNKI全文数据库”和“重庆维普咨询科技期刊全文数据库”、“万方数据库”和SCI等数据库，有关雪铁芋或金钱树文章共有20篇，对用复叶轴诱导原球茎都没有涉及。

检索到的一般相关文献如下：

试验中已取得阶段进展的以叶片为外植体的组织培养，是经愈伤组织诱导不定芽，然后获得组培苗。经本项目组研究试验，该组培苗生长缓慢，经两年培养尚不能达到商品苗的上市要求。所以该技术也未在生产上推广使用。

发明内容

针对现有技术的不足和缺陷，本发明所要解决的技术问题是：提供一种利用雪铁芋复叶轴，通过制备的培养基液，可使雪铁芋繁殖系数增长20倍以上的高效生产原球茎的方法。

本发明实现方法：

步骤一：雪铁芋预培养

将栽植在花盆中的雪铁芋放置在用高锰酸钾和甲醛熏蒸消毒过的房间中，将植株用黑塑料袋套上，促使其茎叶徒长，1个月后，剪取徒长的雪铁芋复叶备用。

步骤二：配制培养基

将玉米棒用粉碎机粉碎成5～10毫米颗粒，在高压蒸汽灭菌锅中121℃高温消毒15～20分钟。取容积为200毫升的组培瓶，每瓶加入消毒后的玉米棒颗粒15～20毫米高。

将粗茎鳞毛蕨(Dryopteris crassirhizoma Nakai)用组织破碎机打成汁液后静置片刻，取上清液备用。

每1000毫升蒸馏水中，添加粗茎鳞毛蕨上清液100～200毫升，5～6克琼脂，10～20克蔗糖，放在容器中搅拌均匀并煮沸后，灌装在200毫升的组培瓶中，每瓶装培养液约30～50毫升，让培养液面略高于玉米棒颗粒。

然后将装有培养基的组培瓶放在蒸汽灭菌锅中121℃高温消毒15～17分钟，拿出放在无菌室冷却后备用。

步骤三：接种

在无菌操作室，将雪铁芋复叶轴用浓度为75％的酒精浸泡10～30秒，再用0.1％升汞浸泡10～15分钟，然后用无菌蒸馏水冲洗3～5遍。用组织破碎机将消毒后的复叶轴打成汁液，接种至组培瓶中，每瓶滴入雪铁芋汁液3～5滴，每滴1～2ml。

步骤四：原球茎培养

将接种后的培养瓶放在无菌培养室中，每天200～500Lx光照培养10～15小时，温度15～27℃，高低温差8～10℃。培养10～20天后有明显的愈伤组织生成。待愈伤组织生长为接种滴液的2-3倍时，将每天培养光照调整为500～1200Lx，10～15小时，温度20～25℃，高低温差2～5℃。继续培养4周后，每块愈伤组织会分化出2～6个原球茎。

待培养瓶中的原球茎生长至1厘米以上时取出，用纯净水清洗干净，放在阴凉处将表皮风干，贮藏备用。