[发明专利]抗IL-17A单克隆抗体及其制备与应用

权利要求书

1.一种特异性结合IL-17A的单克隆抗体，其包含含CDR1、CDR2、和CDR3序列的重链可变区，其特征在于：

所述重链可变区CDR1序列为选自GFTFSGYW、GFTFSDYW的氨基酸；

所述重链可变区CDR2序列为选自INQDGTEK、INQDGNEK的氨基酸；

所述重链可变区CDR3序列为选自VRDYYDFVSDYYIHYWYFDL、VRDYYSLISNYYIHYWYFDL、VRDYYSLISDYYIHYWYFDL、VRDYYSFVSNYYIHYWYFDL的氨基酸。

2.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于，所述抗体的重链可变区序列如SEQ ID NO：1、2、3或4所示的氨基酸序列。

3.一种特异性结合IL-17A的单克隆抗体，其包含含CDR1、CDR2、和CDR3序列的轻链可变区，其特征在于：

所述轻链可变区CDR1序列为选自RASQGVNSYLT、RASQNISNYLA的氨基酸；

所述轻链可变区CDR2序列为选自GASNRES、AASSLET的氨基酸；

所述轻链可变区CDR3序列为选自QQYHGSPLT、QQHWGSPTT的氨基酸。

4.根据权利要求3所述的单克隆抗体，其特征在于，所述抗体的轻链可变区序列如SEQ ID NO：5、6的氨基酸序列。

5.一种特异性结合IL-17A的单克隆抗体，其包含含CDR1、CDR2、和CDR3序列的重链可变区及含CDR1、CDR2、和CDR3序列的轻链可变区，其特征在于：

所述重链可变区CDR1序列为选自GFTFSGYW、GFTFSDYW的氨基酸；

所述轻链可变区CDR1序列为选自RASQGVNSYLT、RASQNISNYLA的氨基酸；

所述重链可变区CDR2序列为选自INQDGTEK、INQDGNEK的氨基酸；

所述轻链可变区CDR2序列为选自GASNRES、AASSLET的氨基酸；

所述重链可变区CDR3序列为选自VRDYYDFVSDYYIHYWYFDL、VRDYYSLISNYYIHYWYFDL、VRDYYSLISDYYIHYWYFDL、VRDYYSFVSNYYIHYWYFDL的氨基酸；

所述轻链可变区CDR3序列为选自QQYHGSPLT、QQHWGSPTT的氨基酸。

6.根据权利要求5所述的单克隆抗体，所述抗体的重链可变区序列为SEQ ID NO：1，轻链可变区序列为SEQ ID NO：5；或重链可变区序列为SEQ ID NO：2，轻链可变区序列为SEQ ID NO：5；或重链可变区序列为SEQ ID NO：3，轻链可变区序列为SEQ ID NO：6；或重链可变区序列为SEQ ID NO：4，轻链可变区序列为SEQ ID NO：6。

7.根据权利要求1-6所述的单克隆抗体，其特征在于，所述抗体为全抗体、单链抗体、Fab片段、F(ab’)2片段或单链Fv片段。

8.根据权利要求7所述的单克隆抗体，其特征在于，所述的抗体是全人源抗体。

9.一种构建权利要求1-6任一项所述单克隆抗体的方法，其步骤在于：

(1)构建全合成噬菌体抗体库，进行抗IL-17A单链抗体的生物淘选，共进行三轮抗体库的富集筛选；

(2)挑取第三轮富集后的抗IL-17A单克隆抗体，进行phage-Abs阳性克隆的筛选，获得四种不同的抗体；

(3)phage ELISA测定步骤(2)所述筛选出的四种单链抗体的亲和力，挑取亲和力高的两株抗体；

(4)以步骤(3)所述挑取的两株亲和力高的抗体为基础，对VHCDR3区进行定点突变构建小容量抗体库，并对该库进行生物淘选和阳性克隆的筛选，获得权利要求1-6任一项所述单克隆抗体。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述步骤(3)挑取的两株抗体的重链可变区序列分别为SEQ ID NO：7和8，轻链可变区的序列分别为SEQ ID NO：5和6。

11.一种表达载体，所述载体包含编码权利要求1-6任一项所述单克隆抗体的多核苷酸序列，所述的载体是pCDNA3.1。