[发明专利]同时检测两种急性白血病标志物电化学传感器的制备方法及应用

权利要求书

1.一种同时检测两种急性白血病标志物电化学传感器的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)将溶菌酶报告探针和γ-干扰素报告探针分别在含有三(2-氯乙基)磷酸酯的溶液中静置，以打开二硫键；再向溶液中添加溶菌酶适体和γ-干扰素适体，溶菌酶报告探针和溶菌酶适体形成溶菌酶报告探针-适体双链结构，γ-干扰素报告探针和γ-干扰素适体形成γ-干扰素报告探针-适体双链结构；

(2)对金电极进行预处理，将处理好的金电极浸在经过步骤(1)预处理后的溶菌酶报告探针-适体双链和γ-干扰素报告探针-适体双链混合液中，室温静置过夜，之后用二次蒸馏水和清洗液清洗；

(3)将步骤(2)处理后的电极浸在含有6-巯基-1-己醇的溶液中，以封闭电极，之后用二次蒸馏水和清洗液清洗；

(4)将步骤(3)处理后的电极作为工作电极，和参比电极、对电极连接在化学工作站上，以得到可同时检测两种急性白血病标志物的电化学传感器。

2.根据权利要求1所述的一种同时检测两种急性白血病标志物电化学传感器的制备方法，其特征在于，步骤(1)中：所述溶菌酶报告探针为5’-巯基-C6-GTGCAGAGCTAAGTAACTCTGCAC-亚甲基蓝-3’，所述溶菌酶适体为5’-ATC AGG GCT AAA GAG TGC AGA GTT ACT TAG-3’，所述γ-干扰素报告探针为5’-巯基-C6-TTCAACCAACTTTTTTTTTTCAACACCCAT-二茂铁-3’，所述γ-干扰素适体为5’-GGG GTT GGT TGT GTT GGG TGT TGT GT-3’。

3.根据权利要求1所述的一种同时检测两种急性白血病标志物电化学传感器的制备方法，其特征在于，步骤(1)中：所述溶液中溶菌酶报告探针-适体双链的浓度为1μmol/L，γ-干扰素报告探针-适体双链的浓度为1μmol/L；所述溶液中含有0.5μL10mmol/L三(2-氯乙基)磷酸酯，还含有20mmol/L Tris-HCl、140mmol/L NaCl、20mmol/L MgCl₂以及20mmol/L KCl，溶液pH值为7.4。

4.根据权利要求1所述的一种同时检测两种急性白血病标志物电化学传感器的制备方法，其特征在于，步骤(1)中：所述静置过程在室温下进行，静置时间为2小时。

5.根据权利要求1所述的一种同时检测两种急性白血病标志物电化学传感器的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述金电极的预处理过程如下：金电极用0.3μm的Al₂O₃粉打磨成镜面，二次蒸馏水清洗后，相继在二次蒸馏水和乙醇溶液中超声50s；将清洗干净的金电极在0.5mol/L的硫酸溶液中循环伏安扫描至稳定，扫描电压为0.2～1.65V，扫描速度为0.1V/s，然后用二次蒸馏水冲洗干净，室温晾干。

6.根据权利要求1所述的一种同时检测两种急性白血病标志物电化学传感器的制备方法，其特征在于，步骤(3)中：所述溶液中MCH的浓度为2mmol/L，溶液中还含有20mmol/L Tris-HCl、140mmol/L NaCl、20mmol/L MgCl₂以及20mmol/L KCl，溶液pH值为7.4。

7.根据权利要求1所述的一种同时检测两种急性白血病标志物电化学传感器的制备方法，其特征在于，步骤(2)与步骤(3)中：所述清洗液为浓度10mmol/L的Tris-HCl缓冲溶液，溶液pH值为7.4。

8.如权利要求1-7中任一权利要求所制备的电化学传感器用于两种急性白血病标志物溶菌酶和γ-干扰素的同时检测。