[发明专利]一种裂殖壶菌发酵液破壁提取其胞内油脂的方法

说明书

技术领域

本发明属于结合式机械破壁领域，涉及从裂殖壶菌发酵液中提取富含DHA初级藻油（二十二碳六烯酸）的一种破壁新方法。

技术背景

裂殖壶菌又称裂壶藻，属于真菌门（Eumycota）、卵菌纲（Oomycetes）、水霉目（Saprolegniales）、破囊壶菌科(Thraustochytriaceae)的一类海洋真菌，单细胞、球形。裂殖弧菌细胞能积累大量对人体有用的活性物质，如：其总脂中的DHA含量非常高,达到35%～68%，且90%以上的脂肪酸是以甘油三酯形式存在的中性酯。结构类似的脂肪酸含量低，容易分离纯化。

DHA是二十二碳六烯酸（Docosahexaenoic Acid）的简称，俗称脑黄金，属系多不饱和脂肪酸（ω-3 Polyunsaturated Fatty Acids，ω-3PUFAs）。 DHA对人体具有重要的生理调节功能，是大脑皮质和视网膜的重要组成物质，能促进婴幼儿的脑部和视力的机能发育，并有助于婴幼儿的生长发育。同时，DHA还具有减少血栓形成、预防心脑血管病、降血脂、预防动脉硬化、抗癌、防治糖尿病、延缓衰老等功效。

    目前，DHA主要从鱼油和微藻中提取，来源不同的两种DHA存在着差别，鱼油主要从脂肪含量较高的海鱼中提取，除了含有DHA（其大多以乙酯型（EE）和甘油三酯型（TG）存在，天然鱼油中DHA以甘油三酯形式存在，但一般含量偏低，约为12%左右），还含有大量其它长链多不饱和脂肪酸，如EPA（二十碳五烯酸）。EPA是花生四烯酸（ARA, 除DHA外，WHO/FAO认可的另外一种对新生儿神经及视觉系统发育及身体生长发育过程中对细胞调节起很重要作用的多不饱和脂肪酸）的竞争性抑制剂，故对婴幼儿的生长发育有阻滞作用。再则，鱼油来自海洋，而海洋中汞及其他重金属的污染已成为一个世界性的环境问题，因此鱼油中所含有重金属以及持续性有机污染物控制也是一个不能忽视的问题。另外捕捉海洋鱼类也会影响海洋生物的多样化和沿海地区的气候。同时，生物多样化的降低也造成沿岸生态系统的破坏，并直接影响到人类的生活。而裂殖壶菌DHA 是通过培育菌种、发酵、萃取、精练而得，DHA含量高，EPA含量低（DHA：EPA的含量比远大于10：1），适合不同人群长期服用。

综上所述，随着生活水平的提高和消费习惯的改变，人们越来越重视自身和家人的健康，相对于鱼油DHA易被人体消化吸收、生物利用度低；微藻/海洋真菌类DHA则更容易被人体吸收、代谢，生物利用度高，且更安全、更稳定，是DHA补充产品的最佳选择。如今DHA在保健品和奶粉行业的应用已相当广泛，在其他食品领域（如食用油、液态奶、果汁、糖果、饼干、面粉等）的应用也在迅速铺开。此外，许多畜牧业、水产养殖业专家和学者也在对DHA的生物学效应进行研究，微藻/海洋真菌类DHA在饲料（水产饲料、动物饲料等）行业的应用也有着潜在的发展空间。可见，微藻/海洋真菌类DHA的应用已经成为未来一个重要的发展趋势，受到了保健食品、医疗、养殖行业等各界的广泛关注。具有更为广阔的市场应用前景。利用相关破壁技术从藻类和真菌生产DHA油脂已经逐步实现工业化生产，近几年虽出现诸如若干专利（如专利号94106621.5、00135338.1、200410082921.3、200410075426.X、200610125476.3、200610028869.2、200710025079.3、200810047859.2、200910033869.5、200910111657.4、200910159368.1、200910225296.6、201110077030.9、201210491610.7等）涉及微藻以及裂殖弧菌发酵液生产DHA不饱和脂肪酸的传统方法，对以裂殖壶菌发酵液酶法与机械法结合破壁提取富含DHA初级油脂工艺尚无先例。

发明内容

本发明目的是提供一种裂殖壶菌发酵液破壁提取其胞内油脂的方法，其是裂殖壶菌发酵液酶法与砂磨机械法结合，高效破壁提取富含DHA初级油脂，并能在工业上有效应用。

为了达成上述目的，本发明是通过下列技术措施实现的：

一种裂殖壶菌发酵液破壁提取其胞内油脂的方法，其特征是：

先将富含DHA的裂殖壶菌发酵液投入破壁罐；

接着用食品级酸或碱调其pH值至6.0～8.0，控制温度35～60℃，并添加裂殖壶菌发酵液重量的1.0～4.0%复合酶，保温搅拌酶解4.0～5.0小时并灭活；

酶解后的发酵液直接过砂磨机砂磨，使发酵液中的单细胞壁/膜彻底破裂；