[发明专利]一种海洋生物源超氧化物歧化酶提取分离工艺在审
申请号: | 201410187808.5 | 申请日: | 2014-05-06 |
公开(公告)号: | CN103966175A | 公开(公告)日: | 2014-08-06 |
发明(设计)人: | 孙继鹏;易瑞灶;洪碧红;黄文文;陈伟珠;晋文慧 | 申请(专利权)人: | 国家海洋局第三海洋研究所 |
主分类号: | C12N9/02 | 分类号: | C12N9/02 |
代理公司: | 厦门市新华专利商标代理有限公司 35203 | 代理人: | 渠述华 |
地址: | 361000 *** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 海洋生物 超氧化物歧化酶 提取 分离 工艺 | ||
1.一种海洋生物源超氧化物歧化酶提取分离工艺,其步骤包括:
步骤1、经匀浆处理的海洋水产加工副产物鱼内脏,按比例加入缓冲溶液,调节提取液pH至6.0~7.4,控制提取温度,搅拌提取2~6小时;
步骤2、提取液经加热处理去除杂蛋白,直接进入下一步工序;
步骤3、提取液冷却后经离心去除沉淀物,上清液通过多级超滤、微滤、纳滤多元膜集成纯化系统脱除大分子、分离提纯及浓缩,获得SOD粗品;
步骤4、SOD粗品经葡聚糖凝胶G-100与DEAE-FF层析联合分离纯化,后经干燥处理,获得高纯度海洋生物源SOD产品。
2.如权利要求1所述的海洋生物源超氧化物歧化酶提取分离工艺,其特征在于:所述步骤1中,经匀浆海洋水产加工副产物鱼内脏与缓冲溶液的质量体积比,即千克:升,为1:2~1:10。
3.如权利要求1或2所述的海洋生物源超氧化物歧化酶提取分离工艺,其特征在于:所述步骤1中,采用的缓冲溶液为0.05~0.3mol/L的Tris-HCL或磷酸缓冲溶液。
4.如权利要求1或2所述的海洋生物源超氧化物歧化酶提取分离工艺,其特征在于:所述步骤1中,采用的缓冲溶液采用盐酸和氢氧化钠控制提取过程中提取液pH至6.0~7.4。
5.如权利要求1所述的海洋生物源超氧化物歧化酶提取分离工艺,其特征在于:所述步骤1中,提取温度控制在60℃以下。
6.如权利要求1或2所述的海洋生物源超氧化物歧化酶提取分离工艺,其特征在于:所述步骤1中,在缓冲溶液中加入铜、锌两种盐,铜离子浓度控制在0.2~20.0mmol/L,锌离子浓度控制在1~20.0mmol/L。
7.如权利要求6所述的海洋生物源超氧化物歧化酶提取分离工艺,其特征在于:所述步骤1中所用的铜锌盐可为硫酸盐、盐酸盐或醋酸盐。
8.如权利要求1所述的海洋生物源超氧化物歧化酶提取分离工艺,其特征在于:所述步骤2中,提取液通过加热去除部分杂蛋白,加热温度为60℃,时间控制在30~120分钟。
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