[发明专利]蟾饲五谷虫抗菌肽的医药用途有效
申请号: | 201410190050.0 | 申请日: | 2014-05-07 |
公开(公告)号: | CN103948632B | 公开(公告)日: | 2018-03-13 |
发明(设计)人: | 张国刚 | 申请(专利权)人: | 沈阳药科大学 |
主分类号: | A61K35/64 | 分类号: | A61K35/64;A61K38/00;A61P31/04 |
代理公司: | 沈阳杰克知识产权代理有限公司21207 | 代理人: | 靳玲 |
地址: | 110016 辽*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 五谷 抗菌 医药 用途 | ||
1.蟾饲五谷虫抗菌肽在制备抑制甲型伤寒沙门杆菌或肠炎沙门杆菌制剂中的应用,其特征在于,所述的蟾饲五谷虫抗菌肽通过如下方法制备:
(1)提取
蟾饲五谷虫为沸水处理过的干燥虫体,称取50g两份,一份用磷酸盐缓冲溶液溶剂处理,所述的磷酸盐缓冲溶液溶剂为:0.05mol/L的NaH2PO4 81.7ml与0.05mol/L Na2HPO4 12.3ml,调PH为6,另一份用0.05mol/L的用乙酸调节PH为5的乙酸铵溶剂处理;
样品干燥虫体和溶剂比为1:2,用匀浆机搅拌半个小时,放置一个晚上,样品液分别记号为1号和2号;
放置过夜的样品,将1号液采用低速离心机以5000r/min的速度离心15min,得上清液,除去大颗粒杂质,将上清液继续用0.22um的滤膜减压过滤,得到的滤液用高速离心机15000r/min的速度离心,除去细胞器杂质物质,滤液继续用0.22um的滤膜过滤的滤液,得到的1号澄清滤液,2号样品液仍然采用相同的处理方法,即得到2号澄清样品液;
(2)样品的除脂
以1号液磷酸盐缓冲溶液所提样品进行除脂处理,首先用相同体积的正己烷萃取,然后得到的水层采用相同体积的乙酸乙酯液离心,离心后得到的水层采用4摄氏度冰箱保存;
(3)样品的浓缩
以80%的硫酸铵沉淀,慢慢的加入硫酸铵,1号澄清滤液除脂后的样品和2号澄清样品液均采取同样的方式处理,盐析半个小时;
(4)样品的再溶解
盐析过的1号和2号蛋白液,利用高速离心机,15000r/min离心,除去上清液,1号采用磷酸盐缓冲溶液溶解,2号采用乙酸铵缓冲溶液溶解,溶解液备用;
(5)样品溶液除菌
在无菌操作台下,用可以灭菌的0.22um的滤膜,用无菌的注射器,吸取1号再溶解液和2号再溶解液,分别过滤膜,得到样品1号无菌液和2号无菌液。
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