[发明专利]一种从蛹虫草中提取虫草素的方法

权利要求书

1.一种从蛹虫草中提取虫草素的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）将干燥的提取原料粉碎后，加水并在真空条件下至少超声提取二次，合并提取液；

（2）将步骤（1）中的提取液粗滤后，通过732型阳离子树脂，得第一流出液； 

（3）对第一流出液进行静置沉降并收集上清液，将上清液再通过732型阳离子树脂，得第二流出液；

（4）将第二流出液通过微孔滤膜进行精滤，得精滤液；

（5）对精滤液进行反渗透浓缩，得第一浓缩液；

（6）将第一浓缩液pH调节为3~4后加入预处理后的732型阳离子树脂进行上样吸附，接着分别用1~3倍柱体积，pH为3~4的盐酸、5~10倍柱体积的纯化水进行洗柱，最后用浓度为0.15~0.25 mol/L的氨水进行洗脱，对洗脱液进行HPLC检测，收集检测有虫草素的洗脱液，精滤，得粗提液；

（7）将粗提液pH调节至10~12后加入预处理后的717型阴离子树脂进行上样吸附，接着分别用1~3倍柱体积，pH为10~12的氢氧化钠溶液进行洗柱，最后用纯化水进行洗脱，对洗脱液进行HPLC检测，收集检测有虫草素的洗脱液，得提纯液；

（8）对提纯液进行反渗透浓缩，得第二浓缩液；

（9）对第二浓缩液进行真空旋转蒸发，得蒸发浓缩液，将蒸发浓缩液置于1~5℃下结晶，抽滤后将得到的晶体溶于纯化水中后至少重结晶二次，得虫草素晶体，最后将虫草素晶体经低温冷冻干燥后即可。

2. 根据权利要求1所述的一种从蛹虫草中提取虫草素的方法，其特征在于，步骤（1）中，所述提取原料为蛹虫草子实体、蛹虫草固体培养基或蛹虫草菌丝体材料。

3.根据权利要求1所述的一种从蛹虫草中提取虫草素的方法，其特征在于，步骤（1）中，提取原料粉碎至10~30目，水的加入量为提取原料质量10~20倍，超声提取的温度为20~30℃，超声提取次数为2~3次，每次超声提取时间为60~90min。

4.根据权利要求1所述的一种从蛹虫草中提取虫草素的方法，其特征在于，步骤（4）中，微孔滤膜的孔径为3~5μm。

5.根据权利要求1所述的一种从蛹虫草中提取虫草素的方法，其特征在于，步骤（5）中，反渗透浓缩的工艺条件为：精滤液温度为20~30℃，进膜压力为0.8~1MPa，体积浓缩比为2.5~3.5:1。

6.根据权利要求1所述的一种从蛹虫草中提取虫草素的方法，其特征在于，步骤（6）中，732型阳离子树脂的预处理步骤为：用纯化水浸泡10~12h后，除去悬浮物，用2~3倍树脂量的1mol/L NaOH溶液浸泡2~3h，用纯化水洗至中性后，再用2~3倍树脂量的1mol/L HCl溶液浸泡2~3h，用纯化水洗至中性后，于50~60℃下恒温烘干。

7.根据权利要求1所述的一种从蛹虫草中提取虫草素的方法，其特征在于，步骤（7）中，717型阴离子树脂的预处理步骤为：用纯化水浸泡10~12h后，除去悬浮物，用2~3倍树脂量的1mol/L NaOH溶液浸泡2~3h，用纯化水洗至中性后，再用2~3倍树脂量的1mol/L HCl溶液浸泡2~3h，用纯化水洗至中性后，于50~60℃下恒温烘干。

8.根据权利要求1所述的一种从蛹虫草中提取虫草素的方法，其特征在于，步骤（8）中，反渗透浓缩的工艺条件为：提纯液温度为20~30℃，进膜压力为0.5~1MPa，体积浓缩比为2~3:1。

9.根据权利要求1所述的一种从蛹虫草中提取虫草素的方法，其特征在于，步骤（9）中，真空旋转蒸发温度为40~50℃，体积浓缩比为120~200：1。