[发明专利]一种从蛹虫草中提取虫草素的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种虫草素提取方法，尤其是涉及一种从蛹虫草中提取虫草素的方法。

 

背景技术

蛹虫草又名北冬虫夏草，与我国名贵中药材冬虫夏草为同属异种，属于真菌界子囊菌门麦角菌科虫草属，其药用活性成分主要为虫草素。由于受原料、纯化过程等因素的影响，其价格一直居高不下，高昂的价格已经成为制约虫草素开发利用的瓶颈。因此研究虫草素的提取工艺和提高其得率具有重要的经济价值和广阔的市场应用潜力。

公开号CN101508715A，公开日为2009年8月19日的中国专利公开了一种蛹虫草中虫草素提取纯化方法，包括：将蛹虫草原料粉碎后以料水比1∶20比例加水混合，进行超声波提取，将提取液离心过滤上大孔树脂柱，吸附流速1.8BV/HR；以15%甲醇水溶液为洗脱剂洗脱树脂柱，用旋转蒸发器在温度60℃下减压浓缩洗脱液，制得蛹虫草虫草素浓缩物。其不足之处在于：（1）超声提取温度为60℃，且在常压下进行，能耗高，且不利于虫草素的溶出，还易造成虫草素在水中的降解；（2）只通过大孔树脂柱进行纯化，纯化效果差；（3）对得到的低浓度溶液（即洗脱液）直接采用旋转蒸发的方式浓缩，不仅操作时间长，效率低，且能耗非常大。

 

发明内容

本发明是为了解决现有技术的虫草素提取方法能耗高，操作时间长，提取效率低，得到的虫草素纯度低的问题，提供了一种从蛹虫草中提取虫草素的方法，对虫草素的提取和纯化工艺进行了优化，工艺步骤与选用的设备简单，可操作性强，能耗低，适合大规模工业化生产，虫草素的得率与纯度高，为虫草素产业化生产提供了技术依据。

 

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种从蛹虫草中提取虫草素的方法，包括以下步骤：

（1）将干燥的提取原料粉碎后，加水并在真空条件下至少超声提取二次，合并提取液。本发明在真空条件下进行超声水提，相对于常规的在常压下进行超声水提，真空超声水提更有利于虫草素的溶出。

（2）将步骤（1）中的提取液粗滤后，通过732型阳离子树脂，得第一流出液。提取液通过732型阳离子树脂以进行第一次脱杂，此时虫草素不交换，而无关的有机或无机阴阳离子以及糖类、脂类等杂质被吸附。

（3）对第一流出液进行静置沉降并收集上清液，将上清液再通过732型阳离子树脂，得第二流出液。上清液再通过732型阳离子树脂，同样的，此时虫草素不交换，以进一步去除有机或无机阴阳离子以及糖类、脂类等杂质，通过二次反吸附的初步分离，以减少杂质成分对后续步骤的干扰，提高虫草素的纯度。

（4）将第二流出液通过微孔滤膜进行精滤，得精滤液。

（5）对精滤液进行反渗透浓缩，得第一浓缩液。传统的浓缩为蒸馏浓缩（含有乙醇时同时对乙醇进行回收），蒸馏温度一般在60℃以上，温度高，不仅能耗高，效率低，而且易造成水溶液中的虫草素发生降解，导致最后得到的虫草素纯度下降，而本发明放弃传统的蒸馏浓缩，采用反渗透浓缩，不仅操作更为简单，分离效率高，能耗大大降低（在室温下进行即可），而且虫草素不会降解。

（6）将第一浓缩液pH调节为3~4后加入预处理后的732型阳离子树脂进行上样吸附，接着分别用1~3倍柱体积，pH为3~4的盐酸、5~10倍柱体积的纯化水进行洗柱，最后用浓度为0.15~0.25 mol/L的氨水进行洗脱，对洗脱液进行HPLC检测，收集检测有虫草素的洗脱液，精滤，得粗提液。

（7）将粗提液pH调节至10~12后加入预处理后的717型阴离子树脂进行上样吸附，接着分别用1~3倍柱体积，pH为10~12的氢氧化钠溶液进行洗柱，最后用纯化水进行洗脱，对洗脱液进行HPLC检测，收集检测有虫草素的洗脱液，得提纯液。通过717型阴离子树脂进一步提纯虫草素，以得到较高纯度的虫草素。

（8）对提纯液进行反渗透浓缩，得第二浓缩液。对提纯液再进行反渗透浓缩以提高提纯液的浓度，有利于大大减少后续步骤中真空旋转蒸发的时间，提高生产效率并降低能耗。

（9）对第二浓缩液进行真空旋转蒸发，得蒸发浓缩液，将蒸发浓缩液置于1~5℃下结晶，抽滤后将得到的晶体溶于纯化水中后至少重结晶二次，得虫草素晶体，最后将虫草素晶体经低温冷冻干燥后即可。 

作为优选，所述提取原料为蛹虫草子实体、蛹虫草固体培养基或蛹虫草菌丝体材料。以蛹虫草子实体、蛹虫草固体培养基或蛹虫草菌丝体作为提取原料，来源广，易得。