[发明专利]鼠Bpifb5基因多克隆抗体及其制备方法

权利要求书

1.一种鼠Bpifb5基因多克隆抗体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

a)用PCR方法扩增序列如SEQIDNO:1所示的Bpifb5基因和序列如SEQIDNO:2所示的pET32a表达质粒；

b)将Bpifb5基因连接到pET32a表达载体中构建重组质粒；

c)将所述重组质粒转化到BL21感受态细菌中，经过培养、诱导、裂解和纯化，得到特异性目的蛋白；

d)免疫兔子后，采血，纯化抗体血清，得到多克隆抗体。

2.如权利要求1所述的鼠Bpifb5基因多克隆抗体的制备方法，其特征在于，所述步骤a)中，PCR扩增时，基因Bpifb5上游引物如SEQIDNO:3所示，基因Bpifb5下游引物如SEQIDNO:4所示；质粒pET32a上游引物如SEQIDNO:5所示，质粒pET32a下游引物如SEQIDNO:6所示。

3.如权利要求1所述的鼠Bpifb5基因多克隆抗体的制备方法，其特征在于，所述步骤c)中，培养时，将含有所述重组质粒的菌液加入到高压灭菌的无抗生素LB培养基中，并加入氨苄抗生素。

4.如权利要求1所述的鼠Bpifb5基因多克隆抗体的制备方法，其特征在于，所述步骤c)中，通过IPTG诱导。

5.如权利要求1所述的鼠Bpifb5基因多克隆抗体的制备方法，其特征在于，所述步骤c)中，利用裂解液进行裂解，所述裂解液包括TrisHCl、NaCl和EDTA。

6.如权利要求1所述的鼠Bpifb5基因多克隆抗体的制备方法，其特征在于，所述步骤c)中，所述纯化包括包涵体蛋白处理和梯度透析。

7.一种鼠Bpifb5基因多克隆抗体，其特征在于，所述抗体识别的蛋白序列如SEQIDNO:7所示。