[发明专利]一种米根霉与皱褶假丝酵母偶联生产L-苹果酸的方法

权利要求书

1.一种米根霉与皱褶假丝酵母偶联生产L-苹果酸的方法，其特征在于，它包括如下步骤：

(1)皱褶假丝酵母经种子培养后，再经扩大培养，过滤回收菌体备用；其中，所述的扩大培养，先在33℃下发酵培养48h，再在35℃下继续发酵培养48h；

(2)米根霉经种子培养形成孢子悬浊液，再经发酵基础培养直至形成颗粒状菌体；

(3)将经过步骤(2)发酵基础培养后的米根霉接种于发酵培养基中，以碳酸钠控制pH值4.0～5.0，35℃下发酵生产富马酸和L-苹果酸，发酵48～60h后，用氨水调节pH值至7.5～8.0，再接入步骤(1)得到的皱褶假丝酵母，维持35℃，与米根霉共培养至全部富马酸转化为L-苹果酸。

2.根据权利要求1所述的米根霉与皱褶假丝酵母偶联生产L-苹果酸的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述的皱褶假丝酵母经种子培养和扩大培养后，菌体密度为30g湿菌体/L以上。

3.根据权利要求1所述的米根霉与皱褶假丝酵母偶联生产L-苹果酸的方法，其特征在于，步骤(2)中，形成颗粒状菌体，颗粒直径0.5～2mm。

4.根据权利要求1所述的米根霉与皱褶假丝酵母偶联生产L-苹果酸的方法，其特征在于，步骤(3)中，所述的发酵培养基，碳源为纤维素水解葡萄糖。