[发明专利]菊花花枯病菌实时荧光PCR检测方法有效
| 申请号： | 201410210430.6 | 申请日： | 2014-05-19 |
| 公开（公告）号： | CN103952492A | 公开（公告）日： | 2014-07-30 |
| 发明（设计）人： | 陈吴健;张明哲;林晓佳;吴志毅;陈曦 | 申请（专利权）人： | 浙江省检验检疫科学技术研究院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 杭州中成专利事务所有限公司 33212 | 代理人： | 金祺 |
| 地址： | 310016 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 菊花 病菌 实时 荧光 pcr 检测 方法 | ||
1.菊花花枯病菌实时荧光PCR检测方法，其特征是：
以待测样品DNA为模板，利用上游引物DL1、下游引物DL2和荧光探针Probe-DL进行PCR扩增，若发生特异性扩增，则表明待测样品中带有菊花花枯病菌D.ligulicola；
所述上游引物DL1为：5，-CAACACTTAAACCCTTTGTAATTGA-3，
所述下游引物DL2为：5，-GGACGTCGTCGTTTTGTTGT-3，；
所述荧光探针Probe-DL为：5，-FAM-ACAACTTTCAACAACGGATC-TAMRA-3，。
2.根据权利要求1所述的菊花花枯病菌实时荧光PCR检测方法，其特征是：
所述PCR扩增的反应体系(20μL)为：
所述PCR扩增的反应条件为：
50℃预热2min，95℃变性10min；然后进入40个循环，95℃15s，60℃1min。
3.根据权利要求2所述的菊花花枯病菌实时荧光PCR检测方法，其特征是：PCR扩增扩增后读取Ct值，当Ct值为小于或等于36时，判定为发生特异性扩增，即表明待测样品中带有菊花花枯病菌D.ligulicola。
4.根据权利要求1、2或3所述的菊花花枯病菌实时荧光PCR检测方法，其特征是：所述待测样品为菊花及菊花产品。
5.根据权利要求4所述的菊花花枯病菌实时荧光PCR检测方法，其特征是：所述菊花产品为菊花切花、菊花切条、干制菊花茶。
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