[发明专利]利用四环素调控的dcf1基因诱导表达系统及其构建方法无效
| 申请号： | 201410210708.X | 申请日： | 2014-05-19 |
| 公开（公告）号： | CN103993029A | 公开（公告）日： | 2014-08-20 |
| 发明（设计）人： | 文铁桥;严煌;黄晨;杨眉;吴喨 | 申请（专利权）人： | 上海大学 |
| 主分类号： | C12N15/63 | 分类号： | C12N15/63;C12N15/66 |
| 代理公司： | 上海上大专利事务所(普通合伙) 31205 | 代理人： | 陆聪明 |
| 地址： | 200444*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 利用 四环素 调控 dcf1 基因 诱导 表达 系统 及其 构建 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种利用四环素调控的dcf1基因诱导表达载体，其特征在于该载体为SEQ ID NO.1所示的碱基序列。
2.一种构建根据权利要求1所述的利用四环素调控的dcf1基因诱导表达载体的方法，其特征在于该方法的具体步骤为：
a. 以pSIREN-RetroQ-TetP为模板，用PCR酶扩增出长为330bp的 TREmod；所述的酶扩增所用引物序列如下，下划线部分为AseI酶切位点：
上游引物：5’-TTATCCATTAATCACTCCTTCTCTAG-3’；
下游引物：5’-TCAAGTTACATTAATCATATGACCT-3’；
b. 将步骤a所得TREmod片段割胶回收，酶切出粘性末端后，用碱性磷酸酶脱磷处理，再连接到载体pEGFP-DCF1的CMV启动子前的AseI位点中，即得到利用四环素调控的dcf1基因诱导表达载体。
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