[发明专利]一种血液降解得到并检测单糖的方法在癌症检测中的应用有效
申请号: | 201410211976.3 | 申请日: | 2014-05-14 |
公开(公告)号: | CN103969371A | 公开(公告)日: | 2014-08-06 |
发明(设计)人: | 张丽娟;曾璇;兰莹;邱培菊;曾洋洋;徐玲玲;周紫婧;韩章润 | 申请(专利权)人: | 中国海洋大学 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 266100 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 血液 降解 得到 检测 单糖 方法 癌症 中的 应用 | ||
1.一种血液降解得到并检测单糖的方法在癌症检测中的应用,所述的降解得到并检测单糖的方法步骤包括:
(1)取样品至安瓿瓶,每管加1mL2M C2HF3O2;
(2)封管,105℃油浴6h,得水解样品溶液;
(3)将水解样品溶液冷却至室温,冷凝浓缩除C2HF3O2;
(4)每管加100uL甲醇,离心浓缩除残留C2HF3O2,重复三次;
(5)得到的干燥样品每管用水溶,再加NH3·H2O调pH至8-14,充分混匀后在室温下静置,再加入1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)水浴;
(6)取出反应物冷却至室温,加HAc中和;
(7)每管加入CHCl3萃取后弃下层CHCl3层,重复三次,将得到的水层过0.22um滤膜,待用于高效液相色谱分析;
色谱条件
色谱柱:ZORBAX SB-C18,0.1M磷酸盐(13.6gKH2PO4,1.8gNaOH)(pH6.7)缓冲液-乙腈(体积比83∶17)等度洗脱,流速:1.0mL/min,检测波长:245nm,进样体积:20uL;
其特征在于,所述降解得到并检测单糖的方法中的样品为血液,所述的应用为将癌症病人或正常人血液中的糖链降解为单糖,检测单糖含量。
2.如权利要求1所述的一种血液降解得到并检测单糖的方法在癌症检测中的应用,其特征在于,所述降解得到并检测单糖的方法中的样品为血清或血浆。
3.如权利要求1所述的一种血液降解得到并检测单糖的方法在癌症检测中的应用,其特征在于,所述的癌症包括肺癌、胃癌、卵巢癌、阴茎癌、食管癌、口腔癌、胆管癌、乳腺癌、壶腹部癌、直肠癌、膀胱癌。
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