[发明专利]一种半合成药物中间体的质量检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及药物检测领域，具体涉及一种半合成药物中间体的质量检测方法。

背景技术

半合成药物是指在天然药物提取物的基础上，进行化合结构改造，所获得药物的统称。而天然药物提取物的质量对最后成药的质量至关重要。

天然药物指纹图谱是一种综合的，可量化的鉴定手段，它是建立在天然药物化学成分系统研究的基础上，主要用于评价天然药物及其提取物质量的真实性、优良性和稳定性。

天然药物及其提取物均为多组分复杂体系，因此评价其质量应采用与之相适应的，能提供丰富鉴别信息的检测方法，建立天然药物指纹图谱将能较为全面地反映天然药物及其提取物中所含化学成分的种类与数量，进而对药品质量进行整体描述和评价。天然药物指纹图谱的研究和建立，对于有效控制天然药物的质量具有重要意义。

近年来，现代中医学研究表明，天然植物药中的黄酮类化合物具有降血糖和血脂、降低心肌耗氧量、软化血管、抗心律不齐、使冠脉和脑血管流量增加等功能，植物中总黄酮测定有高效液相色谱法、毛细管电泳法、紫外分光光度法、气相色谱法等方法，目前，一般采用高效液相色谱法对天然药物中的总黄酮含量进行测定。

本申请发明人对高效液相色谱法测定天然药物中的黄酮类化合物进行研究，发现了一种便捷，灵敏度高的，能够对多种天然药物中的黄酮类化合物进行测定，为产品的质量得到更好的控制奠定基础。

发明内容

本发明涉及的是一种半合成药物中间体的质量检测方法，能全面的分析药物中的黄酮类化合物成分，用以有效的控制产品的质量。

本发明首先公开了一种半合成药物中间体的质量检测方法，采用HPLC指纹图谱法进行检测，具体步骤如下：

1）取中间体粉末样品和对照品粉末，精密称定并以甲醇或乙醇为溶剂溶解、定容后，得供试品溶液和对照品溶液；

2）精密吸取供试品溶液或对照品溶液注入高效液相色谱仪，采用反相色谱柱进行HPLC分析，HPLC指纹图谱法的条件为：柱温20～30℃，流动相为乙腈-水-磷酸系统，梯度洗脱，流速为0.7～1.5ml/mim，检测波长为370nm。

较优的，步骤1）中所述溶剂为30～100v/v%甲醇水溶液或50v/v%乙醇水溶液；

最优的，步骤1）中溶解药物样品的溶剂为50v/v%甲醇水溶液；溶解对照品的溶剂为100v/v%甲醇溶液。

较优的，步骤1）所述溶解为超声溶解。更优的，步骤1）超声溶解的时间为5～

30min。最优的，步骤1）超声溶解的时间为10min。

较优的，步骤1）供试品溶液还需要经0.22μm微孔滤膜过滤。

较优的，步骤3）所述反相色谱柱为AgilentZORBAXSB-C18色谱柱。

较优的，步骤3）所述乙腈-水-磷酸系统中，流动相A为乙腈，流动相B为0.05v/v%磷酸溶液。

更优的，步骤3）所述梯度洗脱程序以及流动相的组成为：洗脱时间0~35min，磷酸溶液：乙腈=95:5，流速为1.0ml/min，洗脱时间35~55min，磷酸溶液：乙腈=85:15，流速为1.5ml/min，洗脱时间55~70min，磷酸溶液：乙腈=45:55，流速为0.7ml/min。

优选的，步骤3）精密吸取供试品溶液或参照物溶液5～15ul，优选10ul注入高效液相色谱仪，进行测定。记录60～90min，优选70分钟的色谱图。

与现有技术相比，本发明由于对色谱条件进行合理设置，使得本发明半合成药物中间体的质量检测方法更为简便、易行、重复性好，通过HPLC指纹图谱检测半合成药物中间体中总黄酮的含量，更利于其质量控制，有助于提高药剂的安全性和稳定性。

具体实施方式

下面结合实施例进一步阐述本发明。应理解，实施例仅用于说明本发明，而非限制本发明的范围。

实施例1

1.仪器与试剂

仪器：Agilent1100型高效液相色谱仪，四元泵，全自动进样仪；二极管阵列检测

器（DAD）；色谱柱：AgilentZORBAXSB-C18StableBondAnalytical4.6*150mm5-Micron。

试药：芦丁；槲皮素；金丝桃苷；金银花总黄酮

2.实验方法

样品溶液的制备

1）供试品溶液的制备：取金银花总黄酮0.5g，精密称定，置25ml容量瓶中，加50%甲醇适量，超声提取10min，冷却后加50%甲醇定容至刻度，用