[发明专利]一种基于Taq酶末端转移酶活性构建T载体的方法有效
| 申请号： | 201410231232.8 | 申请日： | 2014-05-29 |
| 公开（公告）号： | CN103981200B | 公开（公告）日： | 2017-07-14 |
| 发明（设计）人： | 吕新;李玥仁;陈丽华;刘兰英;李巍 | 申请（专利权）人： | 福建省农业科学院中心实验室 |
| 主分类号： | C12N15/63 | 分类号： | C12N15/63;C12N15/64 |
| 代理公司： | 福州元创专利商标代理有限公司35100 | 代理人： | 蔡学俊 |
| 地址： | 350003 福*** | 国省代码： | 福建;35 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基于 taq 末端 转移酶 活性 构建 载体 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种基于TaqDNA聚合酶末端转移酶活性构建T载体的方法，其特征在于：所述方法的步骤包括：
1）利用平末端内切酶酶切出发载体，回收获得线性化平末端载体；2）利用TaqDNA聚合酶的末端转移酶活性，在二价金属阳离子的作用下给线性化平末端载体加T，回收获得中间T载体；
3）利用T4DNA连接酶连接步骤2）所得中间T载体，去除3′-端未加T载体，回收获得T载体；
所述的平末端内切酶为EcoRV、SmaI、ScaI中任意一种；
所述出发载体为pBluescriptSK(+)、pUC18、PGEM-7Zf(+)中任意一种；
所述的出发载体加入量与平末端内切酶酶量比例为:1ug出发载体，加入10U的平末端内切酶酶量；
所述二价金属阳离子为CdCl2，所述CdCl2的浓度为1mM。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于福建省农业科学院中心实验室，未经福建省农业科学院中心实验室许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201410231232.8/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：一种具有周边环境感知功能的车辆摄录仪
- 下一篇：一种便携巡视记录仪
