[发明专利]分子缀合物

权利要求书

1.一种试剂盒，其包含：

缀合物，其包含：

抗体，

可检测标记物，其包含酶，所述酶包括由NHS-PEG-马来酰亚胺连接剂引入到所述酶中的约17-25个马来酰亚胺基团，每个连接剂共价结合所述酶的氨基，和

多个酰肼硫醇连接剂，每个酰肼硫醇连接剂包含位于酰肼基团和硫醇基团之间的一个或多个连接原子，其中所述酰肼硫醇连接剂选自巯基丁酰肼(MBH)、巯基丁酰卡巴肼(MBCH)、巯基乙酰氨基巯基丁酰肼(MAMBH)、硫代己酰氨基巯基丁酰肼(THMBH)、N,N’-(6-肼基-6-氧己烷-1,5-二基)二(2-巯基乙酰胺)(BTAL)、双硫代己酰氨基酰肼基赖氨酸(BTHL)、N-(1,5-二肼基-1,5-二氧戊-2-基)-2-巯基乙酰胺(TAGD)、硫代己酰氨基谷氨酸二肼(THGD)，PEG基的酰肼硫醇连接剂、多官能酰肼硫醇连接剂、PEG基多官能酰肼硫醇连接剂、聚丙烯酰胺酰肼硫醇连接剂及其组合，每个酰肼硫醇连接剂的酰肼基团与抗体的氧化的糖基化Fc部分共价结合，并且酰肼硫醇连接剂之一的硫醇基团经由马来酰亚胺基团之一与可检测标记物共价结合。

2.权利要求1的试剂盒，其中所述硫醇连接剂包含PEG基的酰肼硫醇连接剂。

3.权利要求2的试剂盒，其中所述PEG基的酰肼硫醇连接剂包含巯基-dPEG-酰肼连接剂。

4.权利要求1的试剂盒，其中所述酰肼硫醇连接剂包含MBH或MBCH。

5.权利要求1的试剂盒，其中所述酶是碱性磷酸酶或辣根过氧化物酶。

6.权利要求5的试剂盒，其中所述酶是碱性磷酸酶。

7.权利要求6的试剂盒，其中所述碱性磷酸酶包含交联的碱性磷酸酶。

8.权利要求1的试剂盒，其中所述抗体包括抗半抗原抗体。

9.权利要求1的试剂盒，其中所述抗体包括抗抗体抗体。

10.一种用于检测细胞或组织样品中感兴趣的分子的方法，其包括：

将所述细胞或组织样品与缀合物接触，所述缀合物包含：

抗体，

可检测标记物，其包含酶，所述酶包括由NHS-PEG-马来酰亚胺连接剂引入到所述酶中的约17-25个马来酰亚胺基团，每个连接剂共价结合所述酶的氨基，和

多个酰肼硫醇连接剂，每个酰肼硫醇连接剂包含位于酰肼基团和硫醇基团之间的一个或多个连接原子，其中所述酰肼硫醇连接剂选自巯基丁酰肼(MBH)、巯基丁酰卡巴肼(MBCH)、巯基乙酰氨基巯基丁酰肼(MAMBH)、硫代己酰氨基巯基丁酰肼(THMBH)、N,N’-(6-肼基-6-氧己烷-1,5-二基)二(2-巯基乙酰胺)(BTAL)、双硫代己酰氨基酰肼基赖氨酸(BTHL)、N-(1,5-二肼基-1,5-二氧戊-2-基)-2-巯基乙酰胺(TAGD)、硫代己酰氨基谷氨酸二肼(THGD)，PEG基的酰肼硫醇连接剂、多官能酰肼硫醇连接剂、PEG基多官能酰肼硫醇连接剂、聚丙烯酰胺酰肼硫醇连接剂及其组合，每个酰肼硫醇连接剂的酰肼基团与抗体的氧化的糖基化Fc部分共价结合，并且酰肼硫醇连接剂之一的硫醇基团经由马来酰亚胺基团之一与可检测标记物共价结合；

以及

检测所述缀合物产生的信号，其指示细胞或组织样品中感兴趣的分子的存在。

11.权利要求10的方法，其中所述硫醇连接剂包含PEG基的酰肼硫醇连接剂。

12.权利要求11的方法，其中所述PEG基的酰肼硫醇连接剂包含巯基-dPEG-酰肼连接剂。

13.权利要求10的方法，其中所述酰肼硫醇连接剂包含MBH或MBCH。

14.权利要求10的方法，其中所述酶是碱性磷酸酶或辣根过氧化物酶。

15.权利要求14的方法，其中所述碱性磷酸酶包含交联的碱性磷酸酶。

16.权利要求15的方法，其中所述酶是交联的辣根过氧化物酶。

17.权利要求10的方法，其中所述抗体包括抗半抗原抗体。

18.权利要求10的方法，其中所述抗体包括抗抗体抗体。