[发明专利]一种微生物菌剂的制备方法及得到的微生物菌剂和应用

权利要求书

1.一种微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(a)将短短芽孢杆菌50L-3a、土壤短芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌菌株分别固体活化培养后，制得浓度均为1-3×10⁸CFU/ml的三种菌悬液；

(b)将三种所述菌悬液分别以体积百分数为3-7％的接种量接种至一级种子培养基，培养得到浓度均为1-4×10¹⁰CFU/ml的三种一级种子菌悬液；

(c)将三种所述一级种子菌悬液以等体积混合，然后以体积百分数为2-3％的接种量转接至二级种子培养基，培养得到混合菌浓度为2-5×10¹¹CFU/ml的二级种子混合菌悬液；

(d)将所述二级种子混合菌悬液按体积百分数为2-6％的接种量转接至菌剂发酵培养基，发酵至芽孢浓度为2-5×10¹²CFU/ml、芽孢数占所述发酵菌液总菌数的85％以上，得到微生物菌剂。

2.根据权利要求1所述的微生物菌剂的制备方法，其特征在于，在所述步骤(a)中，采用含有吐温80的无菌水冲洗菌体，所述吐温80占所述无菌水的体积百分数为0.04-0.06％，混匀得到所述菌悬液。

3.根据权利要求1所述的微生物菌剂的制备方法，其特征在于，在所述步骤(b)中，按重量份计，所述一级种子培养基成分包括：玉米粉10-14份、酵母提取物4-6份、氯化钠6-10份和蒸馏水1000份，所述一级种子培养基的pH为7.1-7.3。

4.根据权利要求1所述的微生物菌剂的制备方法，其特征在于，在所述步骤(c)中，按重量份计，所述二级种子培养基成分包括：玉米粉10-14份、酒糟粉8-12份、花生粕粉4-6份、氯化钠5-7份、和蒸馏水1000份，所述二级种子培养基的pH为7.1-7.3。

5.根据权利要求1所述的微生物菌剂的制备方法，其特征在于，在所述步骤(d)中，按重量份计，所述菌剂发酵培养基成分包括：玉米粉13-15份、酒糟粉14-16份、花生粕粉6-8份、麸皮14-16份、氯化钠2-4份、K₂HPO₄3-5份、MnSO₄0.03-0.05份和蒸馏水1000份，所述菌剂发酵培养基的pH为7.1-7.3。

6.根据权利要求1所述的微生物菌剂的制备方法，其特征在于，在所述步骤(b)、所述步骤(c)和所述步骤(d)中，培养条件为35-38℃，210-240rpm/min振荡培养。

7.根据权利要求1-6任一项所述的微生物菌剂的制备方法，其特征在于，将所述微生物菌剂的pH值调为5-5.5，加入氯化钠，至所述氯化钠与所述微生物菌剂的质量百分数为8-10％，制得液态微生物菌剂。

8.根据权利要求1-6任一项所述的微生物菌剂的制备方法，其特征在于，将所述微生物菌剂的pH值调为5.5-6，依次加入氯化钠和丙酸钠，所述氯化钠与所述丙酸钠的重量分别为所述微生物菌剂的重量的4-6％和1.5-3.0％，得到预制液；

在所述预制液中加入载体，所述载体与所述预制液的质量体积比为1-1.5:1-1.5，于45-60℃烘干至含水量低于10％，制得固态微生物菌剂；

其中所述载体为酒糟粉与麸皮的质量比为1-1.5:1-1.5的混合物。

9.一种权利要求1-8任一项所述的制备方法制备的微生物菌剂。

10.一种权利要求9所述的微生物菌剂在城市生活垃圾、厨余垃圾以及畜禽粪便中除臭和发酵腐熟制备有机肥的应用。