[发明专利]一种在真核细胞内其稳定性受蓝光调控的光敏降解子desVVD

权利要求书

1.一种由编码基因编码的光敏降解子desVVD在真核宿主细胞内调控蛋白质水平的方法，其特征在于：通过控制蓝光的强弱在蛋白质翻译后水平控制蛋白质水平的高低，或通过不断切换光照和黑暗的光照条件使蛋白质水平发生大幅度振荡；所述光敏降解子的稳定性在蛋白质翻译后水平上受蓝光调控；

所述光敏降解子编码基因选自序列表中的序列1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37和39所示的基因。

2.根据权利要求1所述一种由编码基因编码的光敏降解子desVVD在真核宿主细胞内调控蛋白质水平的方法，其特征在于：包含所述光敏降解子desVVD的编码基因的表达载体。

3.根据权利要求1所述一种由编码基因编码的光敏降解子desVVD在真核宿主细胞内调控蛋白质水平的方法，其特征在于，所述光敏降解子desVVD的序列选自序列表中的序列2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38和40。

4.根据权利要求1所述一种由编码基因编码的光敏降解子desVVD在真核宿主细胞内调控蛋白质水平的方法，其特征在于：所述光敏降解子desVVD由以下步骤而制备：利用大肠杆菌克隆菌株将光敏降解子desVVD的编码基因构建到真核宿主细胞表达载体中，将该真核宿主细胞表达载体转染/转化真核宿主细胞并表达光敏降解子desVVD。

5.根据权利要求4所述一种由编码基因编码的光敏降解子desVVD在真核宿主细胞内调控蛋白质水平的方法，其特征在于：所述的制备方法还包括：在构建的光敏降解子desVVD的真核宿主细胞表达载体基础上，设计突变引物，并以此引物扩增包含突变序列的真核宿主细胞表达载体，环化后转化大肠杆菌克隆菌株，构建包含新的突变类型的光敏降解子desVVD的真核宿主细胞表达载体，表达并分离纯化新的突变类型的光敏降解子desVVD。

6.根据权利要求1所述一种由编码基因编码的光敏降解子desVVD在真核宿主细胞内调控蛋白质水平的方法，其特征在于：所述光敏降解子desVVD与靶标蛋白的融合蛋白，其中所述靶标蛋白选自mCherry、SFGFP、Fluc、Ura3-mCherry，His3-mCherry，Sir2-mCherry，Hst2-mCherry和mAZ-mCherry。

7.根据权利要求6所述一种由编码基因编码的光敏降解子desVVD在真核宿主细胞内调控蛋白质水平的方法，其特征在于：所述靶标蛋白选自mCherry、SFGFP和Fluc，所述融合蛋白分别为mCherry-desVVD融合蛋白、SFGFP-desVVD融合蛋白和Fluc-desVVD融合蛋白。

8.根据权利要求7所述一种由编码基因编码的光敏降解子desVVD在真核宿主细胞内调控蛋白质水平的方法，其特征在于：所述融合蛋白在真核宿主细胞内调控蛋白质水平，通过控制蓝光的强弱控制蛋白质水平的高低，或通过不断切换光照和黑暗的光照条件使蛋白质水平发生大幅度振荡。