[发明专利]一种从牡丹粕中提取多糖的方法

权利要求书

1.一种从牡丹籽粕中提取多糖的方法，其特征在于，该方法包含下述步骤：

（1）粉碎：将原料牡丹籽粕粉碎至200目，得牡丹籽粕粉，所述的原料牡丹籽粕为牡丹种仁榨油之后的固体饼粕；

（2）酶解：将步骤（1）中的牡丹籽粕粉以料液比1:10～20的比例加入水，在35～55℃的条件下，调pH4～6，加入纤维素酶、糖胺酶和果胶酶；

所加的纤维素酶占物料重的0.1～0.2%，其酶活≥8万U/g；

糖胺酶占物料重的0.1～0.2%，其酶活≥8万U/g；

果胶酶0.1～0.2%，其酶活≥10万U/g， 酶解1～3 h，在95℃下灭酶5-10min，得酶解液；

（3）乙醇提取：取步骤（2）中的酶解浆液，加入95%的乙醇溶液，使酶解液和乙醇溶液的混合溶液中的乙醇体积分数为45～65%，进行超声波提取，提取温度为10～60℃，提取时间为10～60 min；超声频率为20～30 kHz，抽滤，在残渣中加入95%的乙醇溶液，使酶解液和乙醇溶液的混合液中乙醇的体积分数为45～65%，继续提取，其提取的超声波条件同前一次超声波提取；待两次超声波提取之后，再微波提取10～30min，微波提取的条件是:温度 20～50℃,微波功率2MHz～5MHz，得提取液，合并两次的提取液；并减压浓缩至无醇，得浓缩液；

（4）脱蛋白：将步骤（3）中的浓缩液上大孔树脂吸附柱，用纯化水冲洗，收集流出液，在35～55℃的条件下，调pH4～6，加入木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶，所加的木瓜蛋白酶占物料重的0.1～0.2%，其酶活≥8万U/g，所加的菠萝蛋白酶占物料重的0.1～0.2%，其酶活≥8万U/g，酶解1～3 h，在95℃下灭酶，得酶解液；真空浓缩后，采用Sevag法处理浓缩液，重复3次，再经超滤膜超滤和纳滤；所述的膜超滤、纳滤的条件如下：进液压力为0.1～0.5Mpa；料液流速为20～30ml/s；料液温度为20～35℃；当料液原液被超滤至1/10-1/9料液原液量时，再加纯化水稀释，重复超滤多次；料液的pH值控制在6～7；反冲洗周期为每批，反冲洗时间为1小时，所述的超滤膜的截留分子量为10000～100000Da；

（5）脱色：采用活性炭脱色，使多糖溶液达到无色透明，活性炭的用量为滤液重量的0.05%-2%；

（6）减压浓缩至无醇，干燥得牡丹多糖提取物，所述的干燥方式为真空冷冻干燥、喷雾干燥或真空烘干中的任一种。

2.如权利要求1所述的一种从牡丹籽粕中提取多糖的方法，其特征在于，所述的超声提取条件是，提取温度为30℃，提取时间为30min，频率为25kHz。

3.如权利要求1所述的一种从牡丹籽粕中提取多糖的方法，其特征在于，所述的微波提取的条件是，温度 25℃，微波频率2.5MHz。

4.如权利要求1所述一种从牡丹籽粕中提取多糖的方法，其特征在于，所述的步骤（4）中的大孔树脂为HPD200A，HPD100， D-101，D-101A，AB-8中的任一种。

5.如权利要求1所述的一种从牡丹籽粕中提取多糖的方法，其特征在于，所述的步骤（4）中木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶的量分别占物料重的0.1%。

6.如权利要求1所述的一种从牡丹籽粕中提取多糖的方法，其特征在于，所述的步骤（4）中纳滤的条件为：进液压力为0.2Mpa；料液流速为25ml/s；料液温度为30℃。

7.如权利要求1所述的一种从牡丹籽粕中提取牡丹多糖的方法，其特征在于，所述的超虑膜结构为中空纤维超滤膜、卷式或管式超滤膜，采用错流过滤或采用死端过滤。

8.如权利要求1所述的一种从牡丹籽粕中提取多糖的方法，其特征在于，所述的超滤膜材料为纤维素及其衍生物、聚碳酸酯、聚氯乙烯、聚偏氟乙烯、聚砜、聚丙烯腈、聚酰胺、聚砜酰胺、磺化聚砜、交链的聚乙烯醇、改性丙烯酸聚合物中的任一种。