[发明专利]毛叶木姜子的组织培养方法

权利要求书

1.毛叶木姜子的组织培养方法，其特征在于，包括如下步骤： 

(1)培养室的准备 

(2)外植体材料筛选及处理 

选择优良单株，进行基部截干或环割处理，待基部萌条产生后，在有阳光的午后进行采条，得到带芽半木质化萌条，萌条清洗干净后用毛刷轻刷除去杂质，利用自来水流水冲洗2～3h后沥干，然后在无菌条件下利用质量浓度为75％的酒精浸泡20s，无菌水冲洗1次，转入质量浓度为0.1％的HgCl₂消毒4～7min，再以无菌水冲洗5次，沥干水分备用； 

(3)诱导培养 

将萌条修剪为1cm长茎段，剪去叶片，插入含有1/2MS+6-BA1.0mg·L^-1+NAA0.05mg·L^-1+0.7％琼脂+白糖30g·L^-1的培养基瓶中进行不定芽的诱导，置于全光照培养室内培养架的第二层上，关闭培养室顶部和侧面的遮阴网，培养7d后清除被污染瓶苗，然后将顶部和侧面遮阴网全部打开继续培养，培养时控制光照在5000lux，温度25℃，湿度50～60％； 

(4)增殖培养 

当外植体长2.0cm以上后切断成长度为0.5～0.7cm后接入MS+6-BA3.0mg·L^-1+IBA0.2mg·L^-1+0.7％琼脂+白糖30g·L^-1继代培养基中，然后置于培养架的第一层进行增殖培养，控制光照强度8000lux，温度25℃，湿度50～60％； 

(5)生根培养 

芽苗增殖培养30天后，将株高2.0cm以上的健壮无根单苗接种于含有4/5MS+IBA1.0mg·L^-1+NAA0.2mg·L^-1+Ac0.1g·L^-1+0.7％琼脂+白糖30g·L^-1生根培养基上，然后置于自然光条件下的培养室内培养架的第二层或第三层进行生根培养，将光照控制在3000lux内，培养10天后，提高光照强度至6000lux,温度控制在25℃、湿度50～60％，再培养10天后，芽苗根系长至1～1.5cm后，此时将光照强度提高到10000lux，温度升高至27℃再培养7～10天，再次升高光照强度至15000lux，温度提高至30℃，再培养4～5天后，提高光照强度至25000lux，控制室内外温度保持一致，最后培养3～5天后得到根系健壮发达的苗木； 

(6)苗木移栽 

芽苗根系长至2～2.5cm时，清除培养基，将芽苗移栽至利用2g·l^-1的高锰酸钾溶液消毒24小时的基质中培育成苗，浇水后利用遮阴网遮阴60～90％，控制湿度85％以上，逐步转入正常管理。 

2. 根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于，步骤(6)中，所述基质是由重量比为75％的泥炭土和25％的黄心土组成。