[发明专利]一种高杀伤活性的免疫细胞群的培养方法有效
| 申请号： | 201410247638.5 | 申请日： | 2014-06-05 |
| 公开（公告）号： | CN105219710B | 公开（公告）日： | 2020-01-10 |
| 发明（设计）人： | 谌兵来;王玲 | 申请（专利权）人： | 上海厚超生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0783 | 分类号： | C12N5/0783;C12N5/0784;C12N5/078;A61K35/17;A61K35/14;A61P35/00 |
| 代理公司： | 31266 上海一平知识产权代理有限公司 | 代理人： | 马莉华;陆凤 |
| 地址： | 200082 上海*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 杀伤 活性 免疫 细胞 培养 方法 | ||
1.一种淋巴细胞培养基，其特征在于，所述淋巴细胞培养基由基础培养基、IL-2、人CD137L、人SCF和ConA组成，其中，
所述IL-2的浓度为10-100ng/ml；
所述人CD137L的浓度为10-100ng/ml；
所述人SCF的浓度为10-100ng/ml；
所述ConA的浓度为10-100ng/ml。
2.如权利要求1所述的淋巴细胞培养基，其特征在于，所述基础培养基选自下组：RPMI-1640，DMEM，IMDM。
3.如权利要求1所述的淋巴细胞培养基，其特征在于，所述IL-2的浓度为20-80ng/ml；
所述人CD137L的浓度为20-80ng/ml；
所述人SCF的浓度为20-80ng/ml；
所述ConA的浓度为20-80ng/ml。
4.如权利要求1或3所述的淋巴细胞培养基，其特征在于，所述IL-2的浓度为30-50ng/ml；
所述人CD137L的浓度为30-50ng/ml；
血述人SCF的浓度为30-50ng/ml；
所述ConA的浓度为40-60ng/ml。
5.如权利要求1或3所述的淋巴细胞培养基，其特征在于，所述IL-2的浓度为40ng/ml；所述人CD137L的浓度为40ng/ml；所述人SCF的浓度为40ng/ml；所述ConA的浓度为50ng/ml。
6.一种细胞体外培养方法，其特征在于，所述方法包含采用权利要求1-5任一项所述的淋巴细胞培养基对细胞进行培养的步骤，所述细胞为人外周血单核细胞或人外周血淋巴细胞，所述方法包括以下步骤：
(a)提供细胞；
(b)将第一淋巴细胞培养基加入到所述细胞开始进行培养，所述第一淋巴细胞培养基由基础培养基、IL-2、人CD137L、人SCF和ConA组成，其中，
所述IL-2的浓度为10-100ng/ml；
所述人CD137L的浓度为10-100ng/ml；
所述人SCF的浓度为10-100ng/ml；
所述ConA的浓度为10-100ng/ml；
(c)在培养过程中加入第二淋巴细胞培养基进行补液，所述第二淋巴细胞培养基由基础培养基、IL-2、人CD137L和人SCF组成，其中，
所述IL-2的浓度为10-100ng/ml；
所述人CD137L的浓度为10-100ng/ml；
所述人SCF的浓度为10-100ng/ml。
7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，在步骤(c)中采用以下方式进行补液：培养第一周时，每2-4天根据培养细胞的现有培养液体积进行等体积补液一次；培养第二周时，每2-4天进行补液一次，补液体积根据培养细胞的现有培养液体积，进行1-2倍体积补液；培养第三-四周时，一周进行一次补液，根据培养细胞的现有培养液体积，进行2-3倍体积补液。
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