[发明专利]一种利普司他汀的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于医药技术领域，特别涉及了一种利普司他汀的制备方法，具体涉及了一种利用极性溶剂和非极性溶剂交替萃取转相除杂、冷冻除杂和结晶除杂为核心技术的制备利普司他汀的工艺。

背景技术

利普司他汀(Lipstatin)含有两个双键，不溶于水，纯品为油状物，能部分抑制食物中的吸收，可持续维持能量负平衡和减少体重，有效地改善与肥胖相关疾病的危险因素。利普司他汀的作用主要是用来制备其四氢衍生物——奥利司他。奥利司他是一种已上市非中枢神经减肥药，它是长效和强效的特异性胃肠道脂肪酶抑制剂，通过与胃和小肠内的胃脂肪酶和胰脂肪酶的活性丝氨酸部位结合形成共价键，使脂肪酶失去活性，阻止食物中脂肪分解、吸收和利用，从而达到减肥的目的。

目前，国内生产利普司他汀主要是采用微生物发酵法。利普司他汀经过催化氢化得到奥利司他。其中，利普司他汀经过菌种筛选、发酵调控及下游提取纯化工艺的不断优化，可以逐步提高利普司他汀的发酵效价。当对发酵液中的利普司他汀进行提纯，会有利于下一步催化氢化生成奥利司他。

中国发明专利申请CN101948450A公开了一种生产制备奥利司他的方法，对发酵液中的利普司他汀进行纯化阶段采用了过树脂柱，再氢化得奥利司他。CN102304105A中则采用了了硅胶柱层析。

还有现有技术采用包括发酵液预处理、浸提、转相、浓缩的步骤于发酵液中提纯利普司他汀，其在萃取过程中伴随水洗和数次非极性溶媒反洗。

发明内容

为了解决利普司他汀提取、纯化必须过树脂柱和硅胶柱，且含量和提取收率不高的现实，发明人经过大量反复的试验，提供了一种利普司他汀的制备方法，包括发酵液的预处理、浸提、浓缩、非极性溶剂萃取、浓缩、中等级性溶剂萃取、冷冻除杂、浓缩、非极性溶剂结晶，得到含量高达85.3％利普司他汀，整个提取收率在80％以上，制备出的利普司他汀有利于后续生产高质量的奥利司他。

发明人先通过非极性溶剂和极性溶剂两步萃取转相，获得了含量70％以上的利普司他汀，再经过核心的两步操作，低温冷冻除杂和非极性溶剂结晶纯化，获得高质量的利普司他汀。

本发明的技术方案具体包括如下步骤：

1)发酵液预处理：

向利普司他汀发酵液中加入助滤剂，用酸调pH4.0-5.0，搅拌，过滤，得滤饼；

2)浸提：

将1)中所得滤饼用极性溶剂进行浸泡，搅拌，过滤，得含利普司他汀的溶液；

3)浓缩、调溶剂体积浓度：

将2)中过滤所得利普司他汀溶液浓缩至利普司他汀浓度为15～30g/L，加饮用水调节有机溶剂水溶液的体积浓度为50～80％；

4)非极性溶剂萃取：

向3)中所得利普司他汀含水有机溶剂溶液中加入与体系不混溶的非极性溶剂进行萃取，分相得到含利普司他汀的非极性萃取液；

5)浓缩、极性溶剂萃取：

将4)萃取所得利普司他汀的非极性萃取溶液，浓缩至浓度为100～200g/L，加入极性溶剂萃取，分相得利普司他汀的极性萃取溶液；

6)冷冻除杂：

将5)所得利普司他汀的极性萃取液搅拌、降温至5℃以下，保温，然后过滤除去不溶物，得利普司他汀的澄清滤液；滤液浓缩至干，得利普司他汀油状物；

7)结晶：

用溶剂将6)所得利普司他汀油状物进行稀释，使其浓度为50～100g/L，采用降温法，搅拌析晶，过滤得白色利普司他汀晶体；

其中，步骤1)所述的利普司他汀发酵液为现有技术中的发酵液；所述的助滤剂可以为硅藻土、珍珠岩、纤维素、石墨粉、锯屑、氧化镁、石膏、活性炭、酸性白土中的至少一种；优选的助滤剂是硅藻土、氧化镁、珍珠岩中的任一种；加入量为发酵液重量的3～10％。所述的酸优选为盐酸、醋酸、硫酸、草酸中的至少一种。

本发明对步骤2)中浸提的极性有机溶剂进行了优选，优选的溶剂为甲醇、丙酮、乙腈或乙醇中的一种；浸提溶剂与滤饼的体积重量比为(5～10):1。

本发明对步骤3)中有机溶剂水溶液的体积浓度进行了优选，优选加饮用水调节有机溶剂水溶液的体积浓度为60～70％。

本发明对步骤4)中加入的非极性有机溶剂进行了优选，优选石油醚、庚烷或己烷中的任一种，其用量相当于利普司他汀含水有机溶剂溶液体积的0.5～1.5倍。

本发明对步骤5)中加入的极性溶剂进行了优选，优选为乙腈或甲醇，其加入体积与萃取前利普司他汀非极性相的体积比为(1～3):1。