[发明专利]蜡样芽孢杆菌的检测方法及试剂盒有效
申请号: | 201410253239.X | 申请日: | 2012-08-27 |
公开(公告)号: | CN104032000A | 公开(公告)日: | 2014-09-10 |
发明(设计)人: | 施春雷;杨捷琳;史贤明;刘斌;潘良文;袁辰刚 | 申请(专利权)人: | 上海交通大学;中华人民共和国上海出入境检验检疫局 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/06 |
代理公司: | 上海旭诚知识产权代理有限公司 31220 | 代理人: | 郑立 |
地址: | 200240 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 芽孢 杆菌 检测 方法 试剂盒 | ||
1.蜡样芽孢杆菌的检测方法,其特征在于,所述方法用于非疾病诊断的目的,包括:
1)提取待检测样品中的DNA;
2)将步骤1)获得的DNA作为模板,进行实时荧光定量PCR检测;
其中,实时荧光定量PCR检测的靶标为蜡样芽孢杆菌murB基因。
2.如权利要求1所述的方法,其中,实时荧光定量PCR检测所用的荧光探针的核苷酸序列为5'-TGTAAT*GG*TTGTT*CG*CAA-BHQ1-3',标记为星号且带下划线的核苷酸为锁核苷酸。
3.如权利要求2所述的方法,其中,所述的荧光探针中的荧光素为FAM。
4.如权利要求2所述的方法,其中,实时荧光定量PCR检测所用的引物为引物murB-F和murB-R;其中,
murB-F的序列为5'-CCTTCTTCAAGTTCAAATCTCG-3';
murB-R的序列为5'-GTYGTAATGACAGGTGATGGA-3'。
5.如权利要求1所述的方法,其中,所述待检测样品来自于食品。
6.蜡样芽孢杆菌的检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括用于扩增蜡样芽孢杆菌murB基因的引物。
7.如权利要求6所述的蜡样芽孢杆菌的检测试剂盒,其中,所述引物为引物murB-F和murB-R;其中,
murB-F的序列为5'-CCTTCTTCAAGTTCAAATCTCG-3';
murB-R的序列为5'-GTYGTAATGACAGGTGATGGA-3'。
8.如权利要求6所述的蜡样芽孢杆菌的检测试剂盒,其中,所述试剂盒还包括锁核苷酸荧光探针,所述荧光探针的核苷酸序列为
5'-TGTAAT*GG*TTGTT*CG*CAA-BHQ1-3',标记为星号且带下划线的核苷酸为锁核苷酸。
9.如权利要求8所述的试剂盒,其中,所述的荧光探针中的荧光素为FAM。
10.如权利要求6-9中任一所述的试剂盒在制备用于检测蜡样芽孢杆菌的产品中的应用。
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