[发明专利]蜡样芽孢杆菌的检测方法及试剂盒有效

专利信息
申请号: 201410253239.X 申请日: 2012-08-27
公开(公告)号: CN104032000A 公开(公告)日: 2014-09-10
发明(设计)人: 施春雷;杨捷琳;史贤明;刘斌;潘良文;袁辰刚 申请(专利权)人: 上海交通大学;中华人民共和国上海出入境检验检疫局
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12Q1/06
代理公司: 上海旭诚知识产权代理有限公司 31220 代理人: 郑立
地址: 200240 *** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 芽孢 杆菌 检测 方法 试剂盒
【权利要求书】:

1.蜡样芽孢杆菌的检测方法,其特征在于,所述方法用于非疾病诊断的目的,包括:

1)提取待检测样品中的DNA;

2)将步骤1)获得的DNA作为模板,进行实时荧光定量PCR检测;

其中,实时荧光定量PCR检测的靶标为蜡样芽孢杆菌murB基因。

2.如权利要求1所述的方法,其中,实时荧光定量PCR检测所用的荧光探针的核苷酸序列为5'-TGTAAT*GG*TTGTT*CG*CAA-BHQ1-3',标记为星号且带下划线的核苷酸为锁核苷酸。

3.如权利要求2所述的方法,其中,所述的荧光探针中的荧光素为FAM。

4.如权利要求2所述的方法,其中,实时荧光定量PCR检测所用的引物为引物murB-F和murB-R;其中,

murB-F的序列为5'-CCTTCTTCAAGTTCAAATCTCG-3';

murB-R的序列为5'-GTYGTAATGACAGGTGATGGA-3'。

5.如权利要求1所述的方法,其中,所述待检测样品来自于食品。

6.蜡样芽孢杆菌的检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括用于扩增蜡样芽孢杆菌murB基因的引物。

7.如权利要求6所述的蜡样芽孢杆菌的检测试剂盒,其中,所述引物为引物murB-F和murB-R;其中,

murB-F的序列为5'-CCTTCTTCAAGTTCAAATCTCG-3';

murB-R的序列为5'-GTYGTAATGACAGGTGATGGA-3'。

8.如权利要求6所述的蜡样芽孢杆菌的检测试剂盒,其中,所述试剂盒还包括锁核苷酸荧光探针,所述荧光探针的核苷酸序列为

5'-TGTAAT*GG*TTGTT*CG*CAA-BHQ1-3',标记为星号且带下划线的核苷酸为锁核苷酸。

9.如权利要求8所述的试剂盒,其中,所述的荧光探针中的荧光素为FAM。

10.如权利要求6-9中任一所述的试剂盒在制备用于检测蜡样芽孢杆菌的产品中的应用。

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