[发明专利]蜡样芽孢杆菌的检测方法及试剂盒有效
| 申请号： | 201410253239.X | 申请日： | 2012-08-27 |
| 公开（公告）号： | CN104032000A | 公开（公告）日： | 2014-09-10 |
| 发明（设计）人： | 施春雷;杨捷琳;史贤明;刘斌;潘良文;袁辰刚 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学;中华人民共和国上海出入境检验检疫局 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/06 |
| 代理公司： | 上海旭诚知识产权代理有限公司 31220 | 代理人： | 郑立 |
| 地址： | 200240 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 芽孢 杆菌 检测 方法 试剂盒 | ||
1.蜡样芽孢杆菌的检测方法，其特征在于，所述方法用于非疾病诊断的目的，包括：
1)提取待检测样品中的DNA；
2)将步骤1)获得的DNA作为模板，进行实时荧光定量PCR检测；
其中，实时荧光定量PCR检测的靶标为蜡样芽孢杆菌murB基因。
2.如权利要求1所述的方法，其中，实时荧光定量PCR检测所用的荧光探针的核苷酸序列为5'-TGTAAT*GG*TTGTT*CG*CAA-BHQ1-3'，标记为星号且带下划线的核苷酸为锁核苷酸。
3.如权利要求2所述的方法，其中，所述的荧光探针中的荧光素为FAM。
4.如权利要求2所述的方法，其中，实时荧光定量PCR检测所用的引物为引物murB-F和murB-R；其中，
murB-F的序列为5'-CCTTCTTCAAGTTCAAATCTCG-3'；
murB-R的序列为5'-GTYGTAATGACAGGTGATGGA-3'。
5.如权利要求1所述的方法，其中，所述待检测样品来自于食品。
6.蜡样芽孢杆菌的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括用于扩增蜡样芽孢杆菌murB基因的引物。
7.如权利要求6所述的蜡样芽孢杆菌的检测试剂盒，其中，所述引物为引物murB-F和murB-R；其中，
murB-F的序列为5'-CCTTCTTCAAGTTCAAATCTCG-3'；
murB-R的序列为5'-GTYGTAATGACAGGTGATGGA-3'。
8.如权利要求6所述的蜡样芽孢杆菌的检测试剂盒，其中，所述试剂盒还包括锁核苷酸荧光探针，所述荧光探针的核苷酸序列为
5'-TGTAAT*GG*TTGTT*CG*CAA-BHQ1-3'，标记为星号且带下划线的核苷酸为锁核苷酸。
9.如权利要求8所述的试剂盒，其中，所述的荧光探针中的荧光素为FAM。
10.如权利要求6-9中任一所述的试剂盒在制备用于检测蜡样芽孢杆菌的产品中的应用。
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