[发明专利]一株高产L-甲硫氨酸的谷氨酸棒杆菌的构建及应用

权利要求书

1.一株高产L-甲硫氨酸的谷氨酸棒杆菌，其特征在于，所述菌株分类命名为谷氨酸棒杆菌（C.glutamicum subspecies lactofermentum）QW102/pJYW-4-hom^m-lysC^m-brnFE，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC M 2014232。

2.权利要求1所述菌株QW102/pJYW-4-hom^m-lysC^m-brnFE，其特征在于其同时存在以下遗传学特征：表达转运蛋白BrnFE，表达天冬氨酸激酶片段lysC和高丝氨酸脱氢酶片段hom，同时在基因组上缺失thrB和mcbR基因。

3.权利要求1所述的高产L-甲硫氨酸的谷氨酸棒杆菌的应用，其特征在于用于摇瓶水平及发酵罐水平生产甲硫氨酸。

4.用权利要求1所述菌株CCTCC M 2014232生产L-甲硫氨酸的方法，其特征在于：以QW102/pJYW-4-hom^m-lysC^m-brnFE为生产菌，挑活化过的单菌落于50mL/500mL种子培养基，30℃、200 rpm培养18 h；然后按初始OD₅₆₂为1转接至1.2L/3L 发酵罐；通过流加氨水调节pH至7.0，通过关联搅拌转速和曝气率控制溶氧为30%，通过补加50%的葡萄糖控制残糖在20g/L以上；每4 h取样测定菌体浓度、残糖和氨基酸含量；检测结果显示，在发酵48 h 时甲硫氨酸产量达到最高，最高产量为3.1 g/L；

种子培养基：25 g/L 葡萄糖，20 g/L 玉米浆，1 g/L KH₂PO₄，0.5 g/L MgSO₄，1.25 g/L 尿素；

发酵培养基：100 g/L 葡萄糖，20 g/L 玉米浆，20 g/L (NH₄)₂SO₄，1 g/L KH₂PO₄，0.5 g/L MgSO₄，0.01 g/L MnSO₄，0.01 g/L FeSO₄，1 mg/L VB1，6 mg/L VB6，0.1 mg/L VH，0.2 g/L VB12。