[发明专利]用于结核分枝杆菌感染检测及临床治疗效果监测的试剂盒及其用途

说明书

技术领域

本发明属于生物医学检验领域，具体涉及一种用于结核分枝杆菌感染检测及临床治疗效果监测的试剂盒。

背景技术

结核病主要由结核分枝杆菌感染引起，2013年世界卫生组织(WHO)报道指出全球约有1200万结核病患者，其中2012年结核新发病例为860万，死亡病例为130万。结核病给人类健康造成严重威胁。我国是结核病五大高负担国之一，结核病严重阻碍我国经济和社会发展。

结核病防控的难点之一是缺乏快速准确的诊断方法。传统的结核病诊断方法有结核菌素皮试试验(TST)、结核菌痰涂片抗酸染色、结核菌痰培养以及放射性X光片等。近年来新发展的诊断方法有分子生物学方法(PCR法)和免疫学方法等。传统的诊断方法都存在敏感性或特异性低的缺陷，而PCR方法假阳性较高。新型免疫学方法中的γ-干扰素(IFN-γ)释放实验(interferon-gamma release assay,IGRA)是现阶段检测结核分枝杆菌感染准确性较高的方法，现有的商用试剂盒有T-SPOT.TB和QuantiFERON-TB Gold In-Tube(QFT-IT)，这两个试剂盒的敏感性和特异性分别为80％到90％之间，尚有待改进。

人体感染结核分枝杆菌后，体内会产生免疫记忆。当用相同的抗原再次刺激人体免疫细胞时，活化的免疫细胞会分泌大量细胞因子或趋化因子，并具有抗原特异性，即疾病特异性，因而这些免疫细胞分泌的细胞因子或趋化因子具有良好的结核病诊断潜力。

在临床抗结核治疗过程中，结核病人体内的结核分枝杆菌荷载量随着有效治疗的进行而降低，从而导致体内结核抗原特异性免疫细胞数量下降。因而抗原特异性诱导的细胞因子或趋化因子含量也随之下降，因此可见，这些细胞因子或趋化因子能较好地反映临床治疗的有效性，即临床预后价值。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种新的用于检测结核分枝杆菌感染和临床抗结核治疗效果监测的试剂盒及其用途。

在本发明的一方面，提供一种用于结核分枝杆菌感染检测及临床治疗效果监测的试剂盒，所述试剂盒包含：

a)以下特异性抗体：IP-10抗体和/或CD14抗体；

b)抗原刺激物；

c)阳性对照刺激剂。

所述抗原刺激物为蛋白质或多肽。所述抗原刺激物优选为结核分枝杆菌ESAT-6抗原和/或结核分枝杆菌CFP-10抗原中的一条或多条多肽或其类似物。所述的多肽由20个氨基酸组成，所述其类似物为与其同源性在75％以上的多肽或多肽修饰物。所述结核分枝杆菌ESAT-6抗原具体可为SEQ ID NO:1-SEQ ID NO:9所示序列的多肽中的至少一种；所述结核分枝杆菌CFP-10抗原具体可为序列表的SEQ ID NO:10-SEQ ID NO:18所示序列的多肽中的至少一种。所述抗原刺激物为SEQ ID NO:1-SEQ ID NO:18所示序列中的一条或多条多肽。

序列1MTEQQWNFAG IEAAASAIQG，如SEQ ID NO:1所示；

序列2IEAAASAIQG NVTSIHSLLD，如SEQ ID NO:2所示；

序列3NVTSIHSLLD EGKQSLTKLA，如SEQ ID NO:3所示；

序列4EGKQSLTKLA AAWGGSGSEA，如SEQ ID NO:4所示；

序列5AAWGGSGSEA YQGVQQKWDA，如SEQ ID NO:5所示；

序列6YQGVQQKWDA TATELNNALQ，如SEQ ID NO:6所示；

序列7TATELNNALQ NLARTISEAG，如SEQ ID NO:7所示；

序列8NLARTISEAG QAMASTEGNV，如SEQ ID NO:8所示；

序列9QAMASTEGNV TGMFA，如SEQ ID NO:9所示；

序列10MAEMKTDAAT LAQEAGNFER，如SEQ ID NO:10所示；

序列11LAQEAGNFER ISGDLKTQID，如SEQ ID NO:11所示；

序列12ISGDLKTQID QVESTAGSLQ，如SEQ ID NO:12所示；

序列13QVESTAGSLQ GQWRGAAGTA，如SEQ ID NO:13所示；

序列14GQWRGAAGTA AQAAVVRFQE，如SEQ ID NO:14所示；