[发明专利]一种从花椒叶中制备绿原酸及新绿原酸的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种从花椒叶中制备绿原酸及新绿原酸的方法，属于中草药制备及化工技术领域。

背景技术

绿原酸(chlorogenic acid)是由咖啡酸(caffeic acid)与奎尼酸(quinic acid)组成的缩酚酸，别名咖啡鞣酸，是植物体在有氧呼吸过程中经莽草酸途径产生的一种苯丙素类化合物。其广泛存在于植物中，以金银花、杜仲中的含量较高。绿原酸是一种重要的生物活性物质，具有广泛的药理作用和生物活性，不仅是众多药材和中成药抗菌解毒、消炎利胆的主要有效成分，还具有抗病毒、增高白血球、抗肿瘤、降血压、降血脂、清除自由基和兴奋中枢神经系统等作用(王茜，李智，何琦，侯太平.杜仲叶中绿原酸提取分离工艺条件的研究[J].离子交换与吸附，2008，24(1)：73～80)。根据咖啡酰在奎尼酸的结合部位和数目不同，单咖啡酰奎尼酸又分为绿原酸(3-咖啡酰奎尼酸)、隐绿原酸(4-咖啡酰奎尼酸)、新绿原酸(5-咖啡酰奎尼酸)。因此，从天然植物中高效提取绿原酸及其异构体是国内外的研究热点。

花椒(Zanthoxylum bungeanum Maxim，)又名川椒、大红袍，是芸香料、花椒属落叶灌木或小乔木。其果皮可作为调味料，并可提取芳香油，又可入药，种子可食用，也可加工制作肥皂。《本草纲目》中记载花椒性温，味辛，能散寒除湿，解郁结，消宿食，通三焦，温脾胃，补右肾命门，杀蛔虫，止泄泻。在传统中医医学中，花椒的药理功效包括健胃除湿、止痛杀虫、解毒理气、止痒祛腥的功效，可用于治疗积食、停饮、呃逆、呕吐、风寒湿邪所致的关节肌肉疼痛、脘腹冷痛、泄泻、痢疾、阴痒等多种疾病。其他研究表明花椒还可除各种肉类的腥气；促使血管扩张，从而起到降血压的作用。花椒叶是花椒树的叶子，同样具备花椒的性能和味道，可代替花椒果做调料、食用或制作椒茶。目前未见有从花椒叶中制备绿原酸和新绿原酸的专利文献和非专利文献报道。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术不足而提供一种从花椒叶中制备绿原酸及新绿原酸的方法，其特点是花椒系列中的花椒叶多被舍弃，用处少，利用率低的现状，通过从花椒叶中制备绿原酸及新绿原酸的方法制备得到的绿原酸及新绿原酸，从而达到综合利用花椒资源的目的。该制备方法具有工艺简单、操作方便等优点。

本发明的目的由以下技术实施实现，其中所述原料份数除特殊说明外，均为重量份数。

从汉源产花椒叶中提取绿原酸及新绿原酸的方法包括以下步骤：

(1)将干花椒叶粉碎，平均粒度为400～600μm，按料液比1g∶8～30mL加入浓度50～80wt％的甲醇作为提取剂，在室温下震荡24～36h，分离上清液，并将上清液浓缩干燥后获得甲醇浸膏；

(2)将上述甲醇浸膏分散于蒸馏水中，料液比为1g：10～30mL，然后按体积比1：2加入乙酸乙酯震荡萃取2～3次，收集水相萃取物并浓缩干燥，得率为19.8～25.8％；

(3)将上述干燥后的样品上反相树脂SciBioChem MCI-GEL层析柱(填料高度20cm，柱直径3.2cm)，用甲醇-水梯度洗脱，浓度为0wt％、10％、20wt％、30wt％、40wt％、50wt％甲醇，洗脱流速为1～2mL/min，优选流速为1mL/min；

(4)分别收集上述10wt％和20wt％甲醇洗脱液，浓缩干燥后得到样品，用制备高效液相色谱继续分离纯化；制备色谱的分离条件如下：色谱柱为制备柱，流动相为水和甲醇，梯度洗脱；

a收集步骤(4)中10wt％甲醇洗脱液，浓缩干燥后得样品，用制备高效液相色谱继续分离纯化；制备色谱的分离条件如下：ODS-3色谱柱(5μm)；流速，18.9mL/min；柱温，25℃；检测波长，320nm；梯度洗脱液，甲醇和水的体积比为1:3，收集8.4min的色谱峰，减压除去溶剂，即获得新绿原酸化合物，得率为0.03～0.05％(活性组分质量/步骤1中干花椒叶质量)。

b收集步骤(4)中20wt％甲醇洗脱液，浓缩干燥后得样品，用制备高效液相色谱继续分离纯化；制备色谱的分离条件如下：ODS-3色谱柱(5μm)；流速，18.9mL/min；柱温，25℃；检测波长，320nm；梯度洗脱液，甲醇和水的体积比为1:3，收集15.5min的色谱峰，减压除去溶剂，即获得绿原酸化合物，得率为0.03～0.06％(活性组分质量/步骤1中干花椒叶质量)。

绿原酸及新绿原酸的结构式如下：

性能测试与结构表征