[发明专利]一种石斛胚芽茶的生产方法

说明书

技术领域

本发明属于保健饮品领域，具体涉及一种石斛胚芽茶的生产方法。 

技术背景

石斛是我国名贵的中草药，属于单子叶兰科草本植物，一颗石斛蒴果里种子数量巨大，约有2～3万粒种子，但其种胚未分化，缺少胚乳。适宜的营养、光照、温度条件下，石斛种胚会逐渐膨大，萌发形成绿色原球茎，继续培养原球茎顶端会突起产生绿色叶原基，不断分化发育成幼叶，最后形成2～3 cm高的石斛胚芽。目前多采用添加外源激素的方法，促使种胚或原球茎膨大、萌发、分化形成胚芽，进一步形成试管苗。如CN 102657083 A的发明提供了一种铁皮石斛苗茶的制备方法中使用了BA及NAA来促使原球茎分化成胚芽。但外源激素的添加，会随着生长的进行，富集到植物机体内，对食用的安全性存在很大的隐患。寻求安全有效的促进石斛种胚快速萌发、分化产生胚芽的方法对解决现有石斛生产周期长、产品安全性差等问题具有重要意义。

胚芽是种子萌发、分化成苗过程中的中间形态，石斛胚芽具有和石斛植株相同的功效，富含多糖，具有抗疲劳、抗衰老、抗氧化、提高免疫力等功效。在胚芽茶的加工过程中，由于胚芽的茎含水量高、多糖含量高、叶片细小、茎粗大、叶茎纤维含量低，所以采用传统的制茶工艺制作胚芽茶时，会产生焦叶、爆斑、叶片和茎干燥不同步、翻动时易结团和产生碎叶末等现象，严重影响胚芽茶的品质。

寡糖又称低聚糖，是指二至十个单糖单位通过糖苷键连接起来，形成直链或支链的一类糖，具有调节植物抗病毒、增产壮苗、促进植物生长发育等作用，在农业方面具有重要的应用。例如使用较多的低聚壳寡糖可作为一种非特异性信号，对许多植物显示出强烈的免疫诱导活性；还可以产生抗病毒的植保素及免疫蛋白，达到抗病毒的目的。根瘤菌中分泌的根瘤寡糖素（又称结瘤因子）是豆科植物与根瘤菌间形成共生关系的重要糖信号分子。研究结果显示，从人参、红花、黑节草中提取的寡糖素添加到培养基中均能影响西洋参和人参愈伤组织的生长和皂苷的形成。不同植物细胞壁多糖具有不同的糖苷键连接方式，造成其结构的复杂性和物种的专一性，因此，细胞壁断裂产生不同的寡糖分子，作为早期细胞激活信号也具有反应的专一性。目前，石斛寡糖素在霍山石斛种子萌发中作为诱导分化产生胚芽的诱导物质，还未见有报道。

发明内容

为了解决现有石斛胚芽生产过程中外源激素的添加、生产周期长、石斛产品结构单一等问题，本发明提供一种石斛胚芽茶的生产方法。

一种石斛胚芽茶的生产方法包括以下操作步骤：

（1）石斛胚芽的制备；将成熟的石斛荚果的种胚接种于培养基A上，在温度25±2℃、每天光照12小时的条件下培养100～120天，得到绿色石斛胚芽；

所述液体培养基A为添加了石斛寡糖素的MS液体培养基；所述石斛寡糖素中寡糖含量不低于70%；

（2）石斛胚芽茶的制作：将绿色石斛胚芽杀青，揉捻成条形，压片，烘焙，即得到石斛胚芽茶；所得胚芽茶色泽淡绿，条形扁平。

一种石斛胚芽茶的生产方法按照下述步骤进行操作：

（1）石斛寡糖素的制备

按1g：10～80 ml的比例将石斛和蒸馏水，超声波辅助浸提1～2 h，得到浸提液；浸提液在6000～10000 r/min、室温条件下离心4～5 min，得到上清液和沉淀A；将沉淀A按上述条件重复浸提一次，收集并合并两次上清液为上清液A，将上清液A在55～65 ℃、真空度-0.07～-0.10 MPa条件下减压浓缩，得到浓缩提取液A；向浓缩提取液A中添加95%乙醇至乙醇体积百分比为80%，室温条件下静置12～24 h，6000～10000 r/min、室温条件下离心4～5 min，得上清液B和沉淀B，取沉淀B溶于蒸馏水中，得到石斛寡糖粗提液；取石斛寡糖粗提液，每毫升石斛寡糖粗提液中加入1×10³ U的木瓜蛋白酶，在55 ℃下、pH 5.7条件下酶解6～8 h，接着在100 ℃灭活3～5 min，得到石斛寡糖酶解液；取石斛寡糖酶解液，通过截留分子量为2.5～5 KDa的超滤膜组件，在压力0.05～0.5 MPa、流速为0.1～5.0 m/s条件下超滤，收集透过液，截留液经1400 W、2450 MHz微波裂解5～6 min，冷却至室温，再次通过上述超滤膜组件，在上述相同条件下超滤，合并两次透过液，得到石斛寡糖酶解透过液；石斛寡糖酶解透过液通过反渗透系统浓缩，得反渗透浓缩液；将反渗透浓缩液进行干燥，得到石斛寡糖素，所述石斛寡糖素中寡糖含量不低于70%；

（2）石斛胚芽的制备