[发明专利]检测转G2-aroA基因耐除草剂玉米G1105E-823C的引物对有效
申请号: | 201410268436.9 | 申请日: | 2014-06-16 |
公开(公告)号: | CN104017881A | 公开(公告)日: | 2014-09-03 |
发明(设计)人: | 韩庚辰;宋哲;姜付坤;张华 | 申请(专利权)人: | 北京奥瑞金种业股份有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅 |
地址: | 102206 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 g2 aroa 基因 除草剂 玉米 g1105e 823 引物 | ||
1.用于检测或辅助检测待测玉米是否为转G2-aroA基因耐除草剂玉米G1105E-823C的引物对,由序列表中序列1和序列2所示的两条单链DNA分子组成。
2.权利要求1所述的引物对在制备用于检测或辅助检测待测玉米是否为转G2-aroA基因耐除草剂玉米G1105E-823C的试剂盒中的应用。
3.用于检测或辅助检测待测玉米是否为转G2-aroA基因耐除草剂玉米G1105E-823C的试剂盒,包含有权利要求1所述的引物对。
4.根据权利要求3所述的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒还含有由序列表中序列4和序列5所示的两条单链DNA分子组成的内参引物对。
5.权利要求3或4所述试剂盒的制备方法,为如下(a1)或(a2):
(a1)包括如下步骤:将所述引物对的两条单链DNA分子分别单独包装;
(a2)包括如下步骤:将所述引物对的两条单链DNA分子,以及所述内参引物对的两条单链DNA分子分别单独包装。
6.权利要求1所述引物对,或权利要求3或4所述试剂盒在检测或辅助检测待测玉米是否为转G2-aroA基因耐除草剂玉米G1105E-823C中的应用。
7.检测或辅助检测待测玉米是否为转G2-aroA基因耐除草剂玉米G1105E-823C的方法,包括如下步骤:
(1)以所述待测玉米的基因组DNA为模板,采用权利要求1所述引物对进行PCR扩增,获得PCR产物;
(2)根据所述PCR产物的大小,按照如下方法确定所述待测玉米是否为转G2-aroA基因耐除草剂玉米G1105E-823C:若所述PCR产物中含有大小为256bp的DNA片段,则所述待测玉米为或候选为转G2-aroA基因耐除草剂玉米G1105E-823C;若所述PCR产物中不含有大小为256bp的DNA片段,则所述待测玉米不为或候选不为转G2-aroA基因耐除草剂玉米G1105E-823C。
8.根据权利要求6所述的方法,其特征在于:所述大小为256bp的DNA片段为序列表中序列3所示DNA片段。
9.根据权利要求7或8所述的方法,其特征在于:以权利要求1所述引物对进行PCR扩增的退火温度为62℃。
10.转G2-aroA基因耐除草剂玉米G1105E-823C外源插入片段的侧翼序列,为5’侧翼序列,其特征在于:所述5’侧翼序列的核苷酸序列为序列表中序列3。
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