[发明专利]利用SSR分子标记鉴定杏品种的方法

权利要求书

1.用于鉴定杏品种的引物组合，其特征在于，所述引物组合包括用于PCR扩增杏品种SSR分子标记PSSR1、PSSR2和PSSR3的引物对；

其中，用于PCR扩增分子标记PSSR1的引物对分别为：

上游引物PSSR1F：5'-CAGAGTGCCCTCAGAGATTTG-3'和

下游引物PSSR1R：5'-TCCGTCGTCTTCACTGATTT-3'

用于PCR扩增分子标记PSSR2的引物对为：

上游引物PSSR2F：5'-CATGAACAGGGTCAAAAGCA-3'和

下游引物PSSR2R：5'-TATATCCTTACGCGGCCTCA-3'

用于PCR扩增分子标记PSSR3的引物对为：

上游引物PSSR3F：5'-CTGCTCTCACTCAACTCAATGC-3'和

下游引物PSSR3R：5'-CTCCCCTACCCCTCTGTATCTC-3'。

2.权利要求1所述引物组合在杏品种鉴定、植物材料遗传多样性分析、指纹图谱构建及分子标记辅助育种中的应用。

3.一种利用SSR分子标记组合鉴定杏品种的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)提取待测植物的基因组DNA；

2)以待测植物的基因组DNA为模板，分别利用用于PCR扩增杏品种SSR分子标记PSSR1、PSSR2和PSSR3的引物对进行PCR扩增；

3)检测PCR扩增产物；

其中，步骤2)中所述引物对的定义同权利要求1中所述。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤2)中PCR反应体系按20μL计为：10μmol/L上、下游引物各0.4μL，5U/μL Taq DNA聚合酶0.2μL，10mmol/L dNTPs 0.4μL，25mmol/L Mg²⁺1.6μL，40ng/μL模板3μL，10×PCR反应缓冲液2μL，用ddH₂O补足至20μL。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤2)中PCR扩增程序为：94℃预变性3min；94℃变性45s，55～58℃退火30s，72℃延伸45s，共35个循环；最后72℃延伸8min，保存于15℃。

6.含有权利要求1所述引物组合的用于鉴定杏品种的试剂盒。

7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括dNTPs、Taq DNA聚合酶、Mg²⁺、PCR反应缓冲液及标准阳性模板中的至少一种。